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貨號 | GOY-01X0668 |
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產品名稱 | B淋巴瘤細胞:SU-DHL-4 |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
分類 | 細胞系 |
貨號 | GOY-01X0668 |
商品介紹:
名稱 B淋巴瘤細胞:SU-DHL-4 別稱SUDHL4; Sudhl4; SUDHL-4; Sudhl-4; SuDHL 4; SUD-4; SUD4; SU4; Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4; DHL-4; DHL4 種屬人類 年齡(性別)男性,38歲 組織來源腹腔積液 生長特性懸浮細胞 細胞形態淋巴母細胞樣 背景描述Established from the peritoneal effusion of a 38-year-old man with B-NHL (diffuse large cell, cleaved cell type; originally described as "diffuse histiocytic lymphoma") in 1975; cell line carries EZH2 Y641S mutation; assigned to GCB-like lymphoma subtype (germinal center B-cell). Exome and RNA sequence data are available (see Ref 18187 and Exome sequence and RNA-Seq) 生長培養基RPMI-1640+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例5×10^5-1×10^6cells/mL 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~40小時 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ 基因表達情況IgG+; Kappa+; IgM-; IgA-; IgD-; Lambda-; This cell line has relatively high expression levels of Bax; Bak; AIF; high caspase-9 activity. 注意事項該細胞為懸浮細胞,請注意離心收集細胞懸液;請勿直接倒掉細胞培養液。 |
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
培養操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
人 IL10RB / CRFB4 ELISA配對抗體
人 RBP4 / PRBP ELISA配對抗體
人 IL12B / NKSF2 / p40 ELISA配對抗體
人 Fetuin-A / AHSG / FETUA ELISA配對抗體
人 IL1R1 / CD121a ELISA配對抗體
人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 ELISA配對抗體
人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 ELISA配對抗體
人 VEGFR3 / FLT4 ELISA配對抗體
B淋巴瘤細胞:SU-DHL-4500U 人類單鏈選擇性單功能-DNA糖基化 hSMUG1 -20℃保存
2 ug pIRESshyg3 pIRESshyg3 低溫運輸,-20℃保存
無機鹽瓊脂培養基 Inorganic Agar 250g
500mL Phosphate Buffer,0.2M, pH6.8 Phosphate Buffer,0.2M, pH6.8 常溫保存
CCDC158 卷曲螺旋結構域蛋白158抗體 規格: 0.2ml
25g Silver Nitrate 室溫干燥避光保存
Mouse Anti-human IgG/Cy5 Cy5標記的小鼠抗人IgG 規格: 0.1ml
FBXL11 FBXL11蛋白抗體 規格: 0.2ml
MCT1 單羧酸轉運蛋白-1抗體 規格: 0.2mlPhospho-Histone H3 (Ser10) 磷酸化組蛋白H3抗體 規格: 0.1ml
MAG-a/b 髓鞘相關糖蛋白a/b抗體 規格: 0.1ml
Tyrosine Hydroxylase(Neuronal Marker)/Tyk2/TYH 羥化抗體 規格: 0.1ml
3%NaCl脫羧 20支
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