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貨號 | GOY-01S6544 |
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商品屬性:
產品名稱 | |
規格 | 100管/48樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號 | GOY-01S6544 |
商品介紹:
測定意義
AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶,在堿性環境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中,以肝臟為主。
測定原理:
在堿性環境中,AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚;酚與4-氨基林和反應紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510 nm吸光度增加速率,來計算AKP活性。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器和蒸餾水。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
硝酸鋁,九水 99.99% metals basis二氫 99%ECF ELISA Kit 大鼠嗜酸粒趨化因子
硝酸鋁 九水合物 ACS, ≥98% CP,>98.5% (GC)EG-VEGF ELISA Kit 大鼠腺來源的血管內皮生長因子
鋁 CP異喹啉羧酸 98%1,3- BetaD-Glu ELISA Kit 大鼠1,3-βD葡葡糖苷
草酸銨 AR,99.8%1-甲基-3-酸 97%CD30 ELISA Kit 大鼠CD30分子
草酸銨 CP,99.5%2-甲基啉 99%E-Cad ELISA Kit 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白
草酸銨 GR,99.8%-3-羧酸甲酯 99%BTC ELISA Kit 大鼠β素
草酸銨 99.997% metals basis3-甲基喹啉 98%ANG-2 ELISA Kit 大鼠血管生成素2
草酸銨 ACS, ≥99% N-甲基二苯 98%ANG-1 ELISA Kit 大鼠血管生成素1
堿性磷酸酶(AKP/ALP)微量法檢測試劑盒中代類混合標樣代類:、1, 2-二、1, 4-二突觸結合蛋白12抗體
一二溴標準溶液分析標準品,溶劑:大腸桿菌志賀樣素Ⅱ型突變體(O139菌型)抗體
代類:、1,2-二、1,3-二、1,4-二、1,2,4泛素連接Siah1抗體
鄰二二酯標準溶液 1000μg/ml,溶劑:化信號轉導分子Smad-1抗體
鄰二二酯標準溶液5000μg/ml,溶劑:化5-脂氧合抗體
鄰二二丁酯標準溶液200μg/ml,溶劑:化5-脂氧合抗體
2,6-二酚標準溶液 1000μg/ml,溶劑:應激誘導分泌蛋白1抗體
對二標準溶液 1000μg/ml,溶劑:抗腫瘤蛋白ANUP抗體
對二標準溶液溶劑:小谷氨酰三角四肽重復區蛋白α抗體
2,4-二硝標準溶液 1000μg/ml,溶劑:SUGT1蛋白抗體
鄰二標準溶液 1000μg/ml,溶劑:紡錘體和著絲粒相關蛋白3抗體
中1,2-二標樣 濃度范圍:1034±18ug/ml,分析標準品 紡錘體和著絲粒相關蛋白2抗體
間二標準溶液 1000μg/ml,溶劑:轉錄因子蛋白SIM1抗體
間二標樣 分析標準品,體:核轉錄因子SOX14抗體
鄰二二正辛酯標準溶液 1000μg/ml,體:信號轉導與轉錄激活因子1抗體
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
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