實驗操作步驟：  

a．采用認可的方案處死嚙齒動物。

b．立即在無菌超凈臺內用70％乙醇擦洗整個動物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    原髓細胞白血病細胞：HL-60 

別稱HL 60; HL60

種屬人類

年齡（性別）女性，36歲

組織來源外周血；早幼粒細胞；急性粒－單核細胞白血病

生長特性懸浮細胞

細胞形態(tài)原粒細胞

背景描述HL-60細胞是一株早幼粒細胞；HL-60細胞源自一位患有急性粒-單核細胞白血病的36歲白人女性。HL-60細胞自發(fā)分化，丁酸鹽、次、佛波醇、肉豆蔻酸、DMSO(1%-1.5%)、和均可以促進分化。HL-60細胞表現(xiàn)出吞噬活性，并對趨化刺激有響應；HL-60細胞致癌基因myc表達陽性。

生物安全等級1

生長培養(yǎng)基IMDM＋20% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時間~28-40小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in nude mice (subcutaneous myeloid tumors). Yes, in semi-solid media.

受體表達情況complement, expressed; Fc, expressed

基因表達情況tumor necrosis factor (TNF), also known as tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha, TNF alpha), after stimulation with phorbol myristic acid, myc+

注意事項該細胞為懸浮細胞，請注意離心收集細胞懸液；請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。

處理方法：

收到細胞后，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請即時聯(lián)系。并進行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3. 預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上，進行傳代。

注意事項：

1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗，以優(yōu)化實驗條件，取得最佳實驗效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋和管內壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應用的學科領域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

大鼠 EBI3 基因全長ORF克隆

大鼠 B2M 基因全長ORF克隆

大鼠 ATP1B3 基因全長ORF克隆

大鼠 TSPAN7 基因全長ORF克隆

大鼠 LAMP2 基因全長ORF克隆

大鼠 ITGAV 基因全長ORF克隆

大鼠 CD14 基因全長ORF克隆

大鼠 CD8A 基因全長ORF克隆

大鼠 GP1BA 基因全長ORF克隆

大鼠 SIRPA 基因全長ORF克隆

原髓細胞白血病細胞：HL-60 CC16/CCSP  克拉拉細胞蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Bov IgG/FITC  FITC標記的兔抗牛IgG  規(guī)格: 0.3ml

phospho-GAB2 (Tyr643)  磷酸化接蛋白Gab2抗體 規(guī)格: 0.1ml

SPHK2  鞘氨醇激2抗體 規(guī)格: 0.2mlRASD2/Tumor endothelial marker 2  瘤管內皮標記蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Eph receptor A2+A3+A4  內皮細胞受體蛋白激A2+A3+A4抗體 規(guī)格: 0.2mlphosphor-SMAD2(Ser425)  磷酸化細胞信號轉導分子SMAD2抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cathepsin B  組織蛋白B抗體 規(guī)格: 0.1ml

DP-II  橋粒斑蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

NQO1  醌氧化還原抗體 規(guī)格: 0.1ml

100mL PIPES Buffer，0.5M, pH7.0  PIPES Buffer，0.5M, pH7.0  常溫保存

1mg 天然蛋白A Native Protein A -20℃保存

1瓶 NCI-H2227細胞株 NCI-H2227 低溫運輸和保存

50T 人瘤病毒16,18型PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存