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貨號 | GOY-01X0102 |
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產品名稱 | 肝癌細胞:Hep G2 |
規格 | 1×10?cells/T25培養瓶 |
分類 | 細胞系 |
貨號 | GOY-01X0102 |
商品介紹:
名稱 肝癌細胞:Hep G2 別稱HEP-G2; Hep G2; HEP G2; HepG2; HEPG2 種屬人類 年齡(性別)男性,15歲 組織來源肝細胞癌 生長特性貼壁細胞 細胞形態上皮細胞樣 背景描述Hep G2細胞是來自15歲男性白人的組織;Hep G2細胞形態為上皮細胞樣,模式染色體數為55;Hep G2細胞在免疫抑制小鼠中不致瘤。 生物安全等級1 生長培養基MEM+10% FBS+1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:3 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~50-60小時 凍存條件 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% 溫度:37℃ |
使用方法:
收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;
4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。
培養操作:
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
食蟹猴 ALCAM 基因全長ORF克隆
食蟹猴 SIRPG 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CD160 基因全長ORF克隆
食蟹猴 ENPP2 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CD180 基因全長ORF克隆
食蟹猴 GFRA3 基因全長ORF克隆
大鼠 NGF 基因全長ORF克隆
食蟹猴 FLT3 基因全長ORF克隆
食蟹猴 SEMA7A 基因全長ORF克隆
食蟹猴 THBD 基因全長ORF克隆
肝癌細胞:Hep G2 1瓶 WISH細胞株 WISH 低溫運輸和保存
梭菌屬測定用培養基 Clostridium Test Medium 250g
改良V-P培養基 V-P Medium,Modified 250g
MYLK3 肌球蛋白輕鏈激3抗體 規格: 0.2mlGoat Anti-Bovine IgG 羊抗牛IgG 規格: 1mg
ITK/PSCTK2 IL-2誘導型T細胞激抗體 規格: 0.2ml
ECHS1 烯脂酰輔A水解抗體 規格: 0.1ml
5 lipoxygenase/ALOX5 5-脂氧合抗體 0.1ml
MACC1 結腸轉移相關蛋白1抗體 規格: 0.2mlPhospho-BMX/ETK (Tyr40) 磷酸化非受體性蛋白激ETK抗體 規格: 0.1ml
phospho-RGS19(Ser24) 磷酸化G蛋白信號轉導調節因子19抗體 規格: 0.1mlLIR-8/CD85c/LILRB5 白細胞免疫球蛋白樣受體8抗體 規格: 0.2ml
LOXL2 賴氨酰氧化相關蛋白2抗體 規格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Bio 標記的兔抗小鼠IgG-Fc 規格: 0.1ml
ROS/c ros 活性氧簇ROS抗體 規格: 0.1ml
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