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子宮內膜癌細胞:KLE

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具體成交價以合同協議為準

產品型號

品       牌其他品牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-05-06 13:42:05瀏覽次數:187次

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子宮內膜癌細胞:KLE 公司正在出售的產品:1000mL TBE,10X TBE,10X 常溫保存20次 一站式His標記蛋白質微量純化套裝(溶破細胞) One-Stop His-Tagged Protein Miniprep Pack 介質請于20%乙醇中4℃保存,PMSF于-20℃保存,其余試劑5℃放置2 ug pSUPER-retro-neo pSUPER-retro-neo 低溫運輸,-2

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

子宮內膜癌細胞:KLE 

規格

1×10?cells/T25培養瓶

分類

細胞系

貨號

GOY-01X0132

商品介紹:

名稱 子宮內膜癌細胞:KLE 

別稱CVCL_1329

種屬人類

年齡(性別)女性,64

組織來源子宮;子宮內膜

生長特性貼壁細胞

細胞形態上皮細胞樣

背景描述KLE細胞是源自一名64歲白人女性的子宮內膜腫瘤組織,由G·R·Richardson1984年建系。KLE細胞染色體為非整倍體,數目范圍在51-66之間。KLE細胞裸鼠植瘤后,其腫瘤標本在電鏡下顯示,細胞間見緊密相連,細胞表面具有微絨毛。KLE細胞形態特征與孕激素刺激后的子宮內膜相似。

生物安全等級1

生長培養基DMEM/F1210% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:2-1:4

推薦換液頻率2~3/

倍增時間~114小時

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

致瘤性Yes, Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells.

抗原表達情況Blood Type O; Rh+

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養箱中培養;

4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

 

培養操作:

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
圖片13.jpg

細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

大鼠 CD24 基因全長ORF克隆

大鼠 PTPRC 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

大鼠 ITGA1 基因全長ORF克隆

大鼠 ITGAD 基因全長ORF克隆

大鼠 ITGA6 基因全長ORF克隆

大鼠 ITGA4 基因全長ORF克隆

大鼠 ITGB1 基因全長ORF克隆

大鼠 MME 基因全長ORF克隆

大鼠 CD1D1 基因全長ORF克隆

大鼠 CD48 基因全長ORF克隆

子宮內膜癌細胞:KLE phospho-JAK2(Tyr221)  磷酸化蛋白激JAK-2抗體 規格: 0.1mlPRPH2  外周蛋白2抗體 規格: 0.2ml

RGAG4  RGAG4蛋白抗體 規格: 0.2ml

RGS2  G蛋白信號轉導調節因子2抗體 規格: 0.1ml

AMIGO3  粘附分子IgG樣結構域蛋白3抗體 規格: 0.2ml

C6orf1  6號染色體開放閱讀框1抗體 規格: 0.2ml

1 mg BCECF AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

AU5 tag  AU5 tag標簽抗體 規格: 0.1ml

MBP  髓鞘堿性蛋白(磷脂堿性蛋白)抗體 規格: 0.1ml

LIF  白抑制因子抗體 規格: 0.1ml

ELOVL2  鏈脂肪酸延ELOVL2抗體 規格: 0.2ml

2 ug pAP1(PMA)-Luc pAP1(PMA)-Luc 低溫運輸,-20℃保存

乳酸桿菌選擇性肉湯  250g

 


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