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原代細(xì)胞出現(xiàn)低存活率的可能原因及解決方案

時(shí)間:2017-10-25閱讀:229
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原代細(xì)胞出現(xiàn)低存活率的可能原因及推薦解決方案如下:
1.解凍過程中細(xì)胞裂解
推薦的解決方案:可預(yù)期到一定量的細(xì)胞死亡,因此細(xì)胞的濃度應(yīng)足夠高,考慮到這一損失。起始濃度為106至107細(xì)胞/毫升。
2.解凍過程中的問題
推薦的解決方案:在-70℃至-80℃下保存冷凍的培養(yǎng)物,保存時(shí)間為1-5天,但這不是保存的方法。在37℃充分解凍后應(yīng)立即開始培養(yǎng)。
3.對(duì)冷凍液過敏
推薦的解決方案:A.*或部分更換培養(yǎng)基,減少培養(yǎng)基中冷凍液的量。在24小時(shí)后更換培養(yǎng)液體可全部去除冷凍液。
B.留出更多時(shí)間供培養(yǎng)物恢復(fù)。有時(shí)細(xì)胞需要幾周時(shí)間才能形成單層或密集的懸浮物,取決于冷凍時(shí)細(xì)胞的年齡或傳代次數(shù)或在生長(zhǎng)階段中的位置。冷凍的條件在對(duì)數(shù)期。
4.被冷凍的原種細(xì)胞的年齡或冷凍時(shí)培養(yǎng)物的年齡
推薦的解決方案:解凍Z近冷凍的細(xì)胞。原代細(xì)胞處于冷凍狀態(tài)的時(shí)間越長(zhǎng),存活率越低。檢查冷凍細(xì)胞的時(shí)間和方法。在冷凍時(shí)細(xì)胞應(yīng)處于對(duì)數(shù)期。
萘普生    100mg    UV法含量測(cè)定    100198-201004
潑尼松    100mg    含量測(cè)定    100199-201002
青蒿琥酯    50mg    含量測(cè)定    100200-200202
氫溴酸右美沙芬    100mg    含量測(cè)定    100201--201003
舒必利    100mg    UV法含量測(cè)定    100203-200503
沙丁胺醇    100mg    含量測(cè)定    100204-200702
雙氰胺    50mg    TLC法檢查用    100206-200302
水楊酸鎂    50mg    含量測(cè)定    100208-200102
司坦唑醇     100mg     含量測(cè)定    100209-201003 
原代細(xì)胞

 

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