原代細(xì)胞該研究旨在探討Sp1抑制劑光神霉素A(Mithramycin A)對人肺腺癌A549/DDP細(xì)胞 MRP1表達(dá)的影響。不同濃度光神霉素A作用A549/DDP細(xì)胞48 h后, 采用MTT法檢測細(xì)胞存活率, Real time RT-PCR檢測Sp1和MRP1基因表達(dá)水平, Western blot檢測Sp1和MRP1蛋白表達(dá)水平。結(jié)果顯示, 300 nmol/L光神霉素A作用A549/DDP細(xì)胞48 h后Sp1和MRP1 mRNA表達(dá)水平分別降低 31.22%和85.44%, Sp1和MRP1蛋白表達(dá)水平分別降低53.27%和40.42%。提示光神霉素A能夠通過抑制Sp1表達(dá), 從而抑制MRP1表達(dá)。

肺癌是常見癌癥之一, 嚴(yán)重威脅人類的健康。化學(xué)治療是癌癥治療的重要手段, 具有手術(shù)和放射治療不可替代的作用。然而肺癌細(xì)胞多藥耐藥 (multidrug resistance, MDR)是導(dǎo)致化療失敗的主要原因。多藥耐藥是指腫瘤細(xì)胞對多種結(jié)構(gòu)不同、靶位點(diǎn)不同、作用方式不同的抗腫瘤藥物具有抵抗性。多藥耐藥相關(guān)蛋白1(multidrug resistance-associated protein 1, MRP1)基因過表達(dá)是肺癌細(xì)胞產(chǎn)生多藥耐藥的主要機(jī)制之一。

對MRP1基因5′-末端區(qū)分析表明, 在啟動子近側(cè)區(qū)的正負(fù)調(diào)控結(jié)構(gòu)域中, 原代細(xì)胞包含轉(zhuǎn)錄因子Sp1結(jié)合序列。因此, 本研究通過觀察光神霉素A(Mithramycin A)作用人肺腺癌A549/DDP細(xì)胞對Sp1和MRP1表達(dá)的影響, 探討Sp1對MRP1表達(dá)的影響, 為逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞多藥耐藥提供新靶點(diǎn)。
普魯士藍(lán)    100毫升    RT    進(jìn)口/國產(chǎn)
普魯蘭酶    1克    2～8℃，避光    *
葡萄糖胰蛋白胨瓊脂    25毫升        *
葡萄糖氧化酶    100克        *
葡萄糖脫氫酶    5克        *
葡萄糖酸亞鐵    100克        進(jìn)口/國產(chǎn)
葡萄糖酸銅    25克        *
葡萄糖酸鎂    5克    2～8℃    *
葡萄糖酸鉀    100克        *
原代細(xì)胞