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植物維生素B6ELISA試劑盒實驗意事項

時間:2019/11/27閱讀:273
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植物維生素B6(VB6)ELISA試劑盒實驗意事項

1.血清標本如是以無菌操作分離,則可以在2~8℃下保存一周,如為有菌操作,則建議冰凍2.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。

3.吸取液體時速度不易太快,以免產生氣泡,吸取的量不夠準確。

4.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染,一則細菌的生長,其所分泌的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白產生分解作用;二則一些細菌的內源性酶,如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應酶作標記的測定方法產生非特異性干擾。1.5 吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。

5.液體全部加入酶標孔后,將酶標板放在桌子上平行輕輕搖晃30s,使液體充分混合均勻,也使其得到充分的反應。

6.孵育時要使蓋板膜封好酶標板,防止水分蒸發,以防曲線不成線性。

7.實驗前30min將試劑盒中的所有試劑從冰箱取出,使試劑盒中的所有試劑與提取好的樣品溶液的溫度相同,酶標板只要取出所需量。

8.由于底物顯色劑對光及其敏感,因此要避光保存。

要注意避免出現嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標記酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育過程中吸附于固相,從而與后面加入的HRP底物反應顯色

9.手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置15~30s,不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

10.檢測吸光度前應將酶標儀打開,將其預熱30min以上。

11.底物為TMB,避免與皮膚相接觸。終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應盡量避免接觸皮膚。

12.孵育的時間應該嚴格按照試劑盒說明書上的時間為準。

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