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纖維素含量(CLL)測試盒樣品收集、處理及測定意義

時間:2024/5/16閱讀:250
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纖維素含量(CLL)測試盒樣品收集、處理及保存方法:


1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。 乾思細胞


2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。


3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。


4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液


5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。


測定意義:


纖維素是由葡萄糖組成的大分子多糖,通常與半纖維素、果膠和木質素結合在一起,是植物細胞壁的主要結構成分。纖維素是一種重要的膳食纖維,是自然界中分布含量最多的一種多糖。


測定原理:


纖維素為β-葡萄糖殘基組成的多糖,在酸性條件下加熱能分解成β-葡萄糖。β-葡萄糖在強酸作用下,可脫水生成β-糠醛類化合物。β-糠醛類化合物與蒽酮脫水縮合,生成糠醛衍生物。顏色的深淺可間接定量測定纖維素含量。


需自備的儀器和用品:


可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、80%乙醇、、濃硫酸(不允許快遞)、研缽和蒸餾水。

試劑組成和配制:


試劑一:液體×1瓶,4℃保存。


試劑二:液體×1瓶,4℃保存。


試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。


試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。


標準品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標準液,4℃避光保存。





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