§污染是原代細胞培養(yǎng)的大敵。預防和避免污染是細胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵之一。
§一開始就要十分重視，防止污染，否則會前功盡棄，不僅浪費時間，而且浪費人力、物力，甚至造成無法彌補的損失。
（一）污染的類型
§細胞培養(yǎng)過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質(zhì)，包括生物和化學物質(zhì)。
1、細菌污染
§細菌污染是實驗室細胞培養(yǎng)中常見的污染，即使在細胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素，也可能因為操作不慎而引起污染。Z常見的有革蘭氏陽性菌，如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌，其中又以白色葡萄球菌較常見。
§培養(yǎng)細胞受細菌污染后，會出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁，pH改變。污染后原代細胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗，Z后變圓脫落死亡。
小鼠胃癌細胞的球菌感染
細胞培養(yǎng)污染對策及預防方法
2、真菌污染
§真菌污染是細胞培養(yǎng)過程中Z常見的一種，Z常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。
§培養(yǎng)細胞受真菌污染后，可見培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點，有的散在生長，培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁；倒置顯微鏡下可見絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養(yǎng)基中，有的呈鏈狀排列。
§真菌污染后，細胞生長變慢，但Z后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡。
絲狀菌污染
原代細胞培養(yǎng)污染對策及預防方法