當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>公司動態>>原代細胞培養液的主要成份是什么?
實驗室常用的原代細胞培養液的主要成分是氨基酸、葡萄糖、無機鹽、維生素和微量元素等。為了維持穩定的pH,培養液中一般有一個pH緩沖系統,同時常加入少量的酚紅作為pH指示劑。另外培養液中一般需要加入一定量的血清。
在細胞沉淀中加入0.5-1ml的PBS (等滲), 輕輕顛倒混勻,將培養液在室溫條件下1000轉/分,離心10分鐘,棄上清留細胞沉淀。
重復上述操作反復洗滌1~2次。
3、勻漿的方式:手工勻漿,超聲破碎,裂解液裂解,反復凍融。
① 手工勻漿:在細胞沉淀中加入一定量的PBS(PBS的加入量根據所測指標的不同而有所改變,一般加入0.5ml,細胞密度不小于一百萬個/ml),混勻,將細胞懸浮于PBS中,用移液器將細胞懸浮液移至玻璃勻漿管中(2ml玻璃勻漿管),將玻璃勻漿管置于冰水混合物中,手動勻漿3分鐘,然后取破碎好的細胞懸浮液進行測定。
② 超聲破碎:
在細胞沉淀中加入一定量的PBS(PBS的加入量根據所測指標的不同而有所改變,一般加入0.5ml,細胞密度不小于一百萬個/ml),混勻,將細胞懸浮于PBS中,在冰水浴條件下進行如下操作:
a、用超聲粉碎機進行粉碎,可用Soniprep150型超聲波發生器以振幅14微米超聲處理30秒使細胞破碎,也可用國產超聲波發生儀,用400安培,5秒/次,間隙10秒反復3~5次。
b、用超聲細胞破碎儀,300W功率,每次超聲3~5秒,間隔30秒,重復4~5次。
一般培養液都含酚紅作為pH指示劑,它是細胞培養液狀態的一個很好的標志。過長時間的培養或者微生物的污染都會使培養液的pH發生改變。需要注意的是,酚紅可以模擬類固醇激素(尤其是雌性激素)的作用,所以如果培養的原代細胞對雌性激素敏感(比如實驗本身就是研究雌性激素對細胞的作用),就應當使用沒有酚紅的培養液。
100275-200702 含量測定 100mg 鹽酸丙卡特羅
100276-199801 檢查用 50mg 氨魯米特
100277-200702 含量測定 200mg 大豆油
100278-200402 含量測定 50mg 對羥基苯甲酸甲酯
100279-200502 含量測定 100mg 泛酸鈉
100280-201002 含量測定 100mg 格列喹酮
100281-200602 含量測定 100mg 格列吡嗪
100283- 100mg 核黃素磷酸鈉
100284-200602 含量測定 100mg 吉非羅齊
100287-200701 含量測定 100mg 麥芽糖
100288-200201 含量測定 50mg 尿素
原代細胞
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