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細胞名稱 人胚肺成纖維細胞;MRC-5操作步驟
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 MRC-5細胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織,該細胞老化前能傳代42~46個倍增時間。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:5傳代;每周1~2次。
傳代情況 P20
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:11,14;D16S539:9,11;D18S51:15,21;D19S433:14,15;D21S11:31.2;D2S1338:20;D3S1358:15,17;D5S818:11,12;D7S820:10,11;D8S1179:13;FGA:21,23;TH01:8;TPOX:8;vWA:15;
同工酶
染色體 46,XY,部分細胞為亞二倍體
使用權限 A類
人胚肺成纖維細胞;MRC-5操作步驟細胞培養
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基, 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源, 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
人胚肺成纖維細胞;MRC-5操作步驟復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等。細胞狀態良好,飽滿,光澤度好,*,專業技術指導,另有細胞培養類產品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、DMEM、1640培養基、細胞培養瓶等產品。歡迎廣大科研用戶!
用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(GB標準) Simmons Citrate Agar 西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂 250
用于腸道菌計數和腸桿菌科鑒別(MERCK方法) Violet Red Bile Dextrose Agar 腸道菌計數瓊脂 (VRBDA) 250
用于常用細菌斜面傳代及室溫保存 Strain Store Medium 菌種保存培養基 250
用于飲用水,水源水中總大腸菌群的測定(GB標準) Lactose Peptone Broth 乳糖蛋白胨培養液 250
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營養非常豐富,用各種細菌的基礎培養基(AFNOR EP IDF標準) Columbia Blood Agar Base 哥倫比亞血瓊脂基礎 250
用于飲用天然礦泉水中大腸桿菌的檢驗(GB標準) Brilliant Green Lactose Medium 亮綠乳糖培養基 250
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分枝桿菌DNAout
土壤DNAout
細菌DNAout(250次)
細菌DNAout(50次)
一步式細菌DNAout
柱式分枝桿菌DNAout
柱式水樣DNAout
柱式土壤DNAout
柱式微生物基因組DNAout
柱式細菌DNAout(50次)
病毒DNA提取
96孔板病毒DNAout(離心法)(1次)
96孔板病毒DNAout(離心法)(5次)
96孔板病毒DNAout(真空法)(見關聯產品)
M13噬菌體單鏈基因組DNAout(見關聯產品)
λ噬菌體DNAout(見關聯產品)
一管式病毒DNA-RNAout
一管式病毒DNAout(200次)
一管式病毒DNAout(50次)
柱式病毒DNAout
經典法質粒DNA提取
96孔板質粒DNAout(離心法)
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經典法質粒DNA提取
96孔板質粒DNAout(離心法)
Anti-GRO gamma/CXCL3 生長調節致癌基因gamma(GROγ)抗體 Multi-class antibodies 規格: 0.1ml
Anti-CXCL4/PF-4 血小板因子4抗體 Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CXCL5 上皮中性粒細胞活化肽78抗體 Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
人胚肺成纖維細胞;MRC-5操作步驟Anti-GRP 促胃泌素釋放肽抗體 Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-GRP78 葡萄糖調節蛋白78抗體(熱休克蛋白70蛋白5) Multi-class antibodies 規格: 0.1ml
Anti-GRP94/gp96 葡萄糖調節蛋白94抗體 Multi-class antibodies 規格: 0.1ml
Anti-GSK-3 alpha 葡萄糖合成激酶-3α抗體 Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-Phospho GSK3 alpha (Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶3α抗體 Multi-class antibodies 規格: 0.1ml
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