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SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T操作步驟

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更新時間:2017-05-16 16:18:37瀏覽次數(shù):156次

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SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細(xì)胞名稱      SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T操作步驟
形態(tài)特性       上皮樣
生長特性      貼壁生長
特征特性       表達(dá)SV40大T抗原,可用于轉(zhuǎn)染和作為包裝細(xì)胞;用于瞬時轉(zhuǎn)染時可高表達(dá)AP融合蛋白。 
培養(yǎng)條件       DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法       1:4~8傳代;26~36小時1次
傳代情況      C5
凍存條件       基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測      培養(yǎng)法(-)
STR       Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:12;D16S539:9,14;D18S51:17,18;D19S433:17,18;D21S11:28,30.2;D2S1338:19;D3S1358:5,16,17;D5S818:8,9;D7S820:11,12;D8S1179:12,13,14;FGA:21,22,23;TH01:7,9.3;TPOX:11;vWA:16,19,20;
同工酶      
染色體       62~69
使用權(quán)限      A類 
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T操作步驟復(fù)蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
小鼠脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)免疫試劑盒    Mouse Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
小鼠脂蛋白脂酶(LPL)免疫試劑盒    Mouse lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit
小鼠載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒    Mouse apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit
小鼠載脂蛋白B48(apo-B48)免疫試劑盒    Mouse Apolipoprotein B48,apo-B48 ELISA Kit
小鼠載脂蛋白B100(Apo-B100)免疫試劑盒    Mouse apolipoprotein B100,Apo-B100 ELISA Kit
小鼠載脂蛋白B(APOB)免疫試劑盒    Mouse Apolipoprotein B-100,APOB ELISA kit
小鼠載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒    Mouse Apolipoprotein A5,apo-A5 ELISA Kit
小鼠載脂蛋白A1(Apo-A1)免疫試劑盒    Mouse apolipoprotein,Apo-A1 ELISA Kit
小鼠孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒    Mouse Progesterone,PROG ELISA Kit
小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)IgM抗體免疫試劑盒    Mouse keyhole limpet hemocyanin(KLH)IgM antibody ELISA Kit
小鼠鑰孔蟲戚血藍(lán)蛋白(KLH)IgG抗體免疫試劑盒    Mouse keyhole limpet hemocyanin(KLH)IgG antibody ELISA Kit
小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫試劑盒    Mouse inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA KIT

賴氨酸特異性脫甲基酶5A(JARID1A)ELISA試劑盒    ,英文名:    JARID1A ELISA Kit
萊姆IgG(Lyme-IgG)ELISA試劑盒    ,英文名:    Lyme-IgG ELISA Kit
醌NADH脫氫酶1(NQO1)ELISA試劑盒    ,英文名:    NQO1 ELISA Kit
跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員11(MS4A11)ELISA試劑盒    ,英文名:    MS4A11 ELISA Kit
可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒    ,英文名:    sVCAM-1 ELISA Kit
可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒    ,英文名:    sEPCR ELISA Kit
可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒    ,英文名:    VEGFR-2/sFLK-1 ELISA Kit
可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體1(sVEGF R1)ELISA試劑盒    ,英文名:    sVEGF R1 ELISA Kit
可溶性胸苷激酶1(TK1)ELISA試劑盒    ,英文名:    TK1 ELISA Kit
可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA試劑盒    ,英文名:    sAC ELISA Kit
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T操作步驟可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒    ,英文名:    sCKR ELISA Kit
可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒    ,英文名:    sICAM-1 ELISA Kit
可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1(sTREM-1)ELISA試劑盒    ,英文名:    sTREM-1 ELISA Kit
可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒    ,英文名:    sLR ELISA Kit

  

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