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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次羊肺腺瘤病毒探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒

羊肺腺瘤病毒探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號(hào)50次

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-08-11 16:37:25瀏覽次數(shù):150次

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羊肺腺瘤病毒探針?lè)晒舛縍T-PCR試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門(mén)的區(qū)域操作。

產(chǎn)品特點(diǎn):

高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:羊肺腺瘤病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光定量PCR
貨號(hào):CP100990
產(chǎn)品規(guī)格:50
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年儲(chǔ)存條件:
14
或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min。
注意事項(xiàng):
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 76,5,4,32。
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。

無(wú)水硫酸鈉(分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides1 ppm)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides1 ppm sulfate anhydrous  PorcineIerleukin1β,IL-1βELISA試劑盒豬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  紐蛋白(VCL)ELISA試劑盒 ,英文名: VCL ELISA Kit

甲嘧磺隆(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Sulfometuron-methyl  小鼠骨成型蛋白15(BMP-15)ELISA試劑盒 ,英文名: BMP-15 ELISA Kit  rabbitneuroophin4,-4ELISA試劑盒兔子神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(-4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

西草凈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%Simetryne  大鼠(EPI)ELISA檢測(cè)試劑盒RatEpinephrine/Adrenaline,EPIELISAKit 96T/48T  HumanAquaporin1,AQP-1ELISA試劑盒人水通道蛋白1(AQP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

喹禾靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%Quizalofop-ethyl  人百日咳病毒抗體(IgA)試劑盒 Human bordetella peussis aibody IgA ELISA kit  HumanCompleme1inhibitoraoaibody,C1INHELISAKit人補(bǔ)體1抑制物抗體(C1INH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
十一烷(standard for GC,99.5%(GC))質(zhì)量規(guī)格:standard for GC,99.5%(GC)Undecane  HumanSolubleAdenylateCyclase,sACELISAKit人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  大鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒 Rat Leukoiene B4,LT-B4 ELISA Kit

1,1-環(huán)己基二乙酸質(zhì)量規(guī)格:>98%BRCDA, 1,1-Cyclohexanediacetic acid  小鼠白介素17F(IL17F)ELISA試劑盒 ,英文名: IL17F ELISA Kit  CLIAKitfoH(Humayrosinehydroxylase)ELISAKit人酪氨酸羥化酶規(guī)格:48T/96T

乙酸纖維素質(zhì)量規(guī)格:BRCellulose acetate  人前列腺素F(PGF)ELISA檢測(cè)試劑盒humanProstaglandinF,PG-FELISAKit 96T/48T  全組織酸性1酸酶活性染色試劑盒10

乙酸鈰(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%BRCerium(III) acetate hydrate  大鼠精氨酸(Arg)試劑盒 Rat arginine,Arg ELISA kit  ELISAKitTA人抗1壁酸抗體規(guī)格:48T/96T
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