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參數規格:
產品名稱:cDNA第二鏈合成試劑盒
產品分類:RNA/DNA提取試劑盒
貨號:CP100816
產品規格:詳見說明
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
86%RealPAGE預制膠 盒4-Hydroxysapriparaquinone12785
RealPAGE plus凝膠快速制備及電泳試劑盒 次4-Hydroxy-(methoxycarbonylmethyl)cyclohexanone8534
RealPAGE凝膠蛋白電泳試劑盒 板膠/板膠 4-Hydroxy-(3-methoxypropyl),4-dihydroH-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-sulfonamide 1,1-dioxide1541272
SDS-PAGE凝膠快速制備及電泳試劑盒 次 4-Difluoromethoxy-hydroxybenzaldehyde15138
SDS-PAGE凝膠制備試劑盒 次4-Chlorotestosterone acetate8559醋酸氯
小鼠S100蛋白elisa試劑盒 小鼠S100蛋白試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠S100蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠S100蛋白試劑盒、小鼠S100蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Bi-linderone 中文名: 分子式:C34H32O10 度:96.5%
小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 Betamipron 中文名:倍他米隆 分子式:C10H11NO3 度:98.0%
小鼠Qa細胞抗原elisa試劑盒 小鼠Qa細胞抗原試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠Qa細胞抗原試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠Qa細胞抗原試劑盒、小鼠Qa細胞抗原eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質期:6個月。 Bi-linderone 中文名: 分子式:C34H32O10
小鼠Qa細胞抗原2(Qa-2)ELISA試劑盒 Betamipron 中文名:倍他米隆 分子式:C10H11NO3
小鼠Qa細胞抗原2(Qa-2)ELISAKit Ergosterol peroxide glucoside 140447-22-9 中文名:過氧化麥角甾醇葡萄糖苷 分子式:C34H54O8
cDNA第二鏈合成試劑盒PD0325901 PD-0325901 質量規格:>99%,ATP非競爭性的MEK抑制劑 小鼠Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA檢測試劑盒MouseCollageypeⅢ,ColⅢELISAKIT 96T/48T
西他塞坦鈉/司他生坦鈉 Sitaxsentan ; TBC-11249; Thelin 質量規格:度99% 人鈣網蛋白(C)試劑盒 Human C ELISA Kit
西他塞坦鈉/司他生坦鈉 Sitaxsentan ; TBC-11250; Thelin 質量規格:度99% RatIerferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規格:96T/48T
西他塞坦鈉/司他生坦鈉 Sitaxsentan ; TBC-11251; Thelin 質量規格:度99% PASE-1蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25
輪環藤寧四乙酸/1,4,7,10-四氮雜環十二烷-1,4,7,10-四乙酸 Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10-Tetraazacyclododecane-1,4,7,10-tetraacetic acid 質量規格:>95% Mouselipoproteinlipase,LPLELISA試劑盒小鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
拉米夫定 Lamivudine 質量規格:>98%,BR,USP可用于細胞培養 小鼠熱休克蛋白40(HSP40)ELISA試劑盒 ,英文名: HSP40 ELISA Kit
拉米夫定(標準品) Lamivudine 質量規格:HPLC>99%,標準品 豬胰島素(INS)ELISA檢測試劑盒PorcineInsulin,INSELISAKit 96T/48T
鹽酸三氟拉嗪 Trifluoperazine di 質量規格:>99% 大鼠晝夜節律蛋白同源物2(PER2)試劑盒 Rat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit
鹽酸三氟拉嗪(標準品) Trifluoperazine di 質量規格:HPLC>98%,標準品 英文名稱HumanIerleukin-11(IL-11)ELISAKIT人白介素-11(IL-11)規格:96T/48T
皮質甾酮/腎上腺酮 Corticosterone 質量規格:>97.0% 動物脂肪組織細胞分離培養試劑盒10
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
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