當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>PCR檢測試劑盒>>RNA/DNA提取>> 10次3'RACE試劑盒
參數規格:
產品名稱:3'RACE試劑盒
產品分類:RNA/DNA提取試劑盒
貨號:CP100407
產品規格:10次
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
儲存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保溫7min。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
鹽霉素殘留酶聯免疫檢測試劑盒Clemastine fumarate149767富馬酸氯馬斯汀
地塞米松殘留酶聯免疫檢測試劑盒Citrostadienol47檸檬二烯醇
頭孢三合一殘留酶聯免疫檢測試劑盒Citreorosein4813ω-羥基大黃素
泰樂菌素殘留酶聯免疫檢測試劑盒Citalopram hydrobromide597292氫西酞普蘭
四環素類藥物殘留酶聯免疫檢測試劑盒cis-Octahydro-isoindole2182
脂聯素 英文名稱: Adiponectin 英文縮寫: APN/ADP 規格: 48T/96T Valsartan 中文名:纈沙坦 分子式:C24H29N5O3 度:99.0%
脂聯素 英文名稱: Adiponectin 規格: 48T/96T 英文縮寫: APN/ADP Odoroside H 中文名: 分子式:C30H46O8
脂褐質測試盒 Lipfuscin test box Valsartan methyl ester 中文名: 分子式:C25H31N5O3 度:98.0%
脂褐質(不包括比色)檢測 Free fatty acids (NEFA) detection Racecadotril 81110-73-8 中文名:消旋卡多曲 分子式:C21H23NO4S
脂肪型脂肪酸結合蛋白 (FABP4) 作用: ELISA 規格: 48T/96T 進口分裝 Varenicline tartrate 中文名:酒石酸伐侖克林 分子式:C17H19N3O6 度:98.0%
3'RACE試劑盒金絲桃素 HPLC≥98% 10mg 小鼠脂聯素受體1(ADIPOR1)ELISA試劑盒 ,英文名: ADIPOR1 ELISA Kit
金松雙黃酮 HPLC≥98% 20mg 犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA檢測試劑盒CaninehepatitisBvirussurfaceaigen,HBsAgELISAKit 96T/48T
筋骨草甾酮C HPLC≥98% 10mg 犬前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒 Canine prostate specific aigen,PSA ELISA Kit
京尼平 HPLC≥98% 20mg 英文名稱HumanOncostatinM,OSMELISAKIT人抑瘤素M(OSM)規格:96T/48T
京尼平苷酸 HPLC≥98% 20mg 化大鼠腎上腺髓質素(AM)基因重組表達載體(pcDNA-AM)10微克
京尼平龍膽雙糖苷 HPLC≥98% 20mg RatHighdensitylipoprotein,HDLELISA試劑盒大鼠高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒規格:96T/48T
九里香酮 HPLC≥98% 20mg 小鼠脂聯素(human adiponectin)ELISA試劑盒 ,英文名: human adiponectin ELISA Kit
D HPLC≥98% 20mg 牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA檢測試劑盒Bovinerudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T
長春瑞濱 HPLC≥98% 20mg 人AP-5復合物β亞基(PP1030)試劑盒 human PP1030 ELISA Kit
長春質堿 HPLC≥98% 20mg 英文名稱MouseIL-2sRαELISAkit小鼠白介素2可溶性受體α鏈(CD25)(IL-2sRα)規格:96T/48T
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
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