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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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豬腎細(xì)胞;LLC-PK1操作步驟

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更新時(shí)間:2017-05-29 09:13:38瀏覽次數(shù):237次

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豬腎細(xì)胞;LLC-PK1操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購(gòu)!

公司細(xì)胞庫(kù)細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株,如:人滑膜細(xì)胞,人胃癌細(xì)胞,人細(xì)胞,人腎近曲小管上皮細(xì)胞,肝癌細(xì)胞,心肌細(xì)胞,子宮內(nèi)膜細(xì)胞等。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo),另有細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶
細(xì)胞名稱     豬腎細(xì)胞;LLC-PK1操作步驟
形態(tài)特性      上皮樣
生長(zhǎng)特性     貼壁生長(zhǎng)
特征特性      該細(xì)胞源自3~4周齡的Hampshire豬腎組織,可產(chǎn)生纖溶酶原激活物。 
培養(yǎng)條件      M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS)  3%FBS
傳代方法      1:3~1:6傳代;2~3天1次。
傳代情況     C6
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)     培養(yǎng)法(-)
STR      -
同工酶     
染色體      32~40
使用權(quán)限     A類
豬腎細(xì)胞;LLC-PK1操作步驟細(xì)胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí), 必須注意安全, 預(yù)防冷凍管之爆裂。
2、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí), 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO 敏感之細(xì)胞外, 絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無法生長(zhǎng)或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無法存活。
豬腎細(xì)胞;LLC-PK1操作步驟復(fù)蘇操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
majority of epithelial tissues, with the exception of adult squamous epithelium and some specific epithelial cell types including hepatocytes and gastric epithelial cells. EpCAM expression has been reported to be a possible marker of early malignancy, with expression being increased in tumour cells, and de novo expression being seen in dysplastic squamous epithelium.
Subunit : Monomer. Interacts with phosphorylated CLDN7.
Subcellular Location : Lateral cell membrane; Single-pass type I membrane protein. Cell junction, tight junction.
Tissue Specificity : Highly and selectively expressed by undifferentiated rather than differentiated embryonic stem cells (ESC). Levels rapidly diminish as soon as ESC's differentiate (at protein levels). Expressed in almost all epithelial cell membranes but not on mesodermal or neural cell membranes. Found on the surface of adenocarcinoma.
Similarity : Belongs to the EPCAM family.
Contains 1 thyroglobulin type-1 domain.
英文名稱  Anti-E cadherin/CD324 

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GCNT1葡萄糖轉(zhuǎn)移酶抗體    ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。    英文名稱:    GCNT1    GCNT1葡萄糖轉(zhuǎn)移酶抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長(zhǎng)期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。
胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體相互作用蛋白1抗體    ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。    英文名稱:    GIPC1    胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體相互作用蛋白1抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長(zhǎng)期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。
豬腎細(xì)胞;LLC-PK1操作步驟鳥苷酸環(huán)化酶α1/GCS-α-1抗體    ,現(xiàn)貨供應(yīng),貨期短,質(zhì)量可靠。僅用于科研實(shí)驗(yàn)不應(yīng)用于臨床。我們用專業(yè)的態(tài)度,*的服務(wù),全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)。    英文名稱:    Guanylyl Cyclase alpha 1    鳥苷酸環(huán)化酶α1/GCS-α-1抗體    代理品牌有R&D、Santa Cruz、Bipec、Millipore等品牌,品種多達(dá)10000多種。    保存環(huán)境:2-8℃ 短期保存或<-20℃長(zhǎng)期保存保存 1 年以上,避免反復(fù)凍融。

 

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