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細胞名稱 恒河猴腎細胞;RM-2說明書
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雌性獼猴的腎組織。2004年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養條件 M-199: with Earle's Balanced Salts Solution (EBSS) 15%NBS
傳代方法 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況 P3
凍存條件 基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權限 B類
恒河猴腎細胞;RM-2說明書復蘇操作要點:
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內膜細胞等。細胞狀態良好,飽滿,光澤度好,*,專業技術指導,另有細胞培養類產品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養基、細胞培養瓶等產品。歡迎廣大科研用戶!
恒河猴腎細胞;RM-2說明書細胞培養
1、冷凍管應如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養時, 是否應馬上去除DMSO?
除少數特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養條件不同之培養基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基, 若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基, 細胞大都無法立即適應, 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源, 所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
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蛋白分子量 predicted molecular weight: on threonine 218 and tyrosine 220 by MEK5. ERK5 is activated in response to certain growth factors and bioactive peptides, however the upstream activators are distinct from those that activate ERK1 and 2.
Function : Atypical MAPK protein. Phosphorylates microtubule-associated protein 2 (MAP2) and MAPKAPK5. The precise role of the complex formed with MAPKAPK5 is still unclear, but the complex follows a complex set of phosphorylation events: upon interaction with atypical MAPKAPK5, ERK4/MAPK4 is phosphorylated at Ser-186 and 恒河猴腎細胞;RM-2說明書then mediates phosphorylation and activation of MAPKAPK5, which in turn phosphorylates ERK4/MAPK4. May promote entry in the cell cycle (By similarity).
Subunit : Homodimer. Heterodimer with ERK3/MAPK6. Interacts with (via FRIEDE motif) MAPKAPK5.
Subcellular Location : Cytoplasm. Nucleus.
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