人小腸粘膜上皮細胞提取物【Human Intestinal: Normal Intestinal Mucosa Epithelial Cell Derivatives】 人小腸粘膜上皮細胞提取物是從人原代小腸粘膜上皮細胞提取的，人原代人小腸粘膜上皮細胞從正常人小腸粘膜上皮組織制備。正常人小腸粘膜上皮組織采集自各地方醫院，采集工作根據IRB 和 HIPAA批準的方案進行。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

收到凍存細胞的處理方法：
1.37°C水浴預熱培養基；
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續暖細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。

實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1175954-87-6  Arachidonoyl m-Nitroaniline  50mg  Mycobacterium avian禽結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 

1175954-87-6  Arachidonoyl m-Nitroaniline  5mg  Mycobacterium avium鳥分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 

117609-50-4  Tauroursodeoxycholate dihydrate  10mM*1mLinDMSO  Mycobacterium asiaticum亞洲分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 

117609-50-4  Tauroursodeoxycholate dihydrate  50mg  Mycobacterium avian禽結核分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 

117620-76-5  H-Pro-Thr-His-Ile-Lys-Trp-Gly-Asp-OH  100mg  Mycobacterium abscessus complex膿腫分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒
143TK細胞，胸腺激酶缺陷性細胞系 鼠傷寒沙門氏菌Ta100 大鼠腎小球系膜細胞;HBZY-13,5-二-L-酪氨酸3,5-Diiodo-L-tyrosine質量規格：BR，98%

CX3CL1 Protein Canine 重組狗 Fractalkine / CX3CL1 蛋白 (Fc 標簽)L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽L-Proline methyl ester 質量規格：>98.5%,BR

MG-63(骨肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CD320 / 8D6A 細胞裂解液 (陽性對照) L-絲氨酸甲酯鹽酸鹽L-Serine methyl ester 質量規格：>98%,BR

犬胸腺細胞;cf2ThL-色氨酸甲酯鹽酸鹽L-Tryptophan methyl ester 質量規格：>98%,BR

前列腺平滑肌細胞(HPSMC)(5×105)L-酪氨酸甲酯L-Tyrosine methyl ester 質量規格：>98%,BR
人小腸粘膜上皮細胞提取物說明滑膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)維生素C鈉（標準品）質量規格：含量測定 ascorbate

骨髓間充質干細胞(hMSCs) 肝癌細胞，Hep G2細胞 C127(細胞)硝酸硫胺（標準品）質量規格：含量測定Thiamine nitrate

癌細胞;MDA-MB-157α-細辛腦,細辛(標準品)質量規格：HPLC≥99%,標準品alpha-Asarone

BMPR1A Others Mouse 小鼠 ALK-3 / BMPR1A 細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸二氧丙嗪（標準品）質量規格：鑒別Dioxopromethazine

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1特比萘芬-d7鹽酸鹽質量規格：美國進口Terbinafine-d7
注意事項：
1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色
，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。