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當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養>>成纖維細胞抑制劑及其它>> T25m2肺上皮細胞和腫瘤原代細胞操作

肺上皮細胞和腫瘤原代細胞操作

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號T25m2

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-22 11:31:28瀏覽次數:118次

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肺上皮細胞和腫瘤原代細胞操作收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

人肺MatchPair: 肺上皮細胞和腫瘤原代細胞【Human Lung MatchPair:Normal Human Alveolar Epithelial Cells and Lung Carcinoma Primary Cells 產品描述:提供的細胞均來自新鮮組織,提供的細胞均來自新鮮組織,用于培養該細胞的組織采集是根據國際標準方案進行。細胞的培養采用公司PrimaCellTM細胞培養試劑盒來優化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質量的穩定。在生物技術部標準的操作流程下,細胞可以保持分化狀態,進而可以用于評估體外藥物模型系統和調節特定基因的遺傳功能。

發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。提供的細胞有標準的鑒定流程,保證細胞的純度在90%以上,且不含有 HIV-1 HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。

保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的細胞,如是新鮮細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。

產品名稱

肺上皮細胞和腫瘤原代細胞操作

規格

T25m2

貨號

CS-964408

收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊)
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37 5CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min
2PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
犬血栓調節蛋白(TM)試劑盒 Dog thrombomodulin,TM ELISA Kit  13241-28-6大黃酚-8-O-β-D-葡萄糖苷說明書  Chrysophal 8-O-glucoside

英文名稱MouseAILELISAKIT小鼠(AIL)規格:96T/48T  113443-70-2大黃酸-8-O-β-D-葡萄糖苷品牌  Rhein-8-O-β-D-glucopyranoside

腸侵襲性大腸桿菌(EeroinvasiveE.coli)鑒定16SrDNAPCR擴增檢測試劑盒20  514-47-6大戟二烯醇規格  Euphol

RatGasoiestinalcancerMarker-CA199ELISA試劑盒大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒規格:96T/48T  28978-02-1大薊苷廠家  Pectolinarin

小鼠足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒 ,英文名: PCX ELISA Kit  539-15-1大麥芽堿說明書  Hordenine
74805-90-6甲基麥冬高黃酮A品牌  methylophiopogononeA   組織1酸二酯酶5(PDE5)活性酶連續循環定1比色法定量檢測試劑盒20

7437-55-08-香葉草氧基補骨脂素廠家  8-Geranyloxypsoralen    組織1酸二酯酶4(PDE4)活性熒光定量檢測試劑盒10

7437-54-9甲基辛弗林鹽酸鹽廠家  4-hydroxyephedrine    組織1酸二酯酶4(PDE4)活性酶連續循環光譜法定量檢測試劑盒20

7432-28-2五味子醇甲品牌  Schisandrin  組織1酸二酯酶3(PDE3)活性熒光定量檢測試劑盒10

74285-86-2雷酚內酯說明書  Triptophenolide    組織1酸二酯酶3(PDE3)活性酶連續循環光譜法定量檢測試劑盒10
肺上皮細胞和腫瘤原代細胞操作RatIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISA試劑盒大鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒規格:96T/48T  1617-53-4穗花杉雙黃酮品牌  Amentoflavone

小鼠吲哚胺2,3-雙加氧酶1(IDO1)ELISA試劑盒 ,英文名: IDO1 ELISA Kit  572-31-6黃杞苷規格  Engeletin

小鼠全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA檢測試劑盒MouseiactParathormone,i-PTHELISAKit 96T/48T  57420-46-98-O-乙酰山梔苷甲酯廠家  8-O-Acetyl shanzhiside methyl ester

人結核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)試劑盒 Human tuberculosis aibody IgG,TB-Ab IgG ELISA Kit  64421-28-9山梔苷甲酯說明書  Shanzhiside methylester

Ratai-gonadoopin-releasinghormonereceptoraibody,GHR-AbELISAKit大鼠促性腺激素釋放激素受體抗體(GHR-Ab)ELISA試劑盒規格:96T/48T  27741-01-1京尼平苷酸品牌  Geniposidic acid
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,375%CO2培養。

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