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當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養>>細胞,組織提取物>> T25m2小鼠大隱靜脈組織提取物直銷

小鼠大隱靜脈組織提取物直銷

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具體成交價以合同協議為準

產品型號T25m2

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-22 08:58:32瀏覽次數:130次

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小鼠大隱靜脈組織提取物直銷收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 

收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min;
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C,5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊)
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。

小鼠大隱靜脈組織提取物【Mouse Vascular : Normal Saphenous Vein Derivatives】大隱靜脈是最長的靜脈,靜脈血管壁薄、內腔大,內膜折疊形成靜脈瓣。靜脈瓣一般成對排列,呈半月狀小袋,袋口朝向心,利于靜脈回流,防止血液逆流。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠大隱靜脈組織中高質量的總RNAPCR準備的第一條cDNA鏈,蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mgRNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

潛在的應用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。

產品名稱

小鼠大隱靜脈組織提取物直銷

規格

T25m2

貨號

CS-964273

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37 ,5CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,37,5%CO2培養。
 112-37-8  Undecanoic Acid  5g  Parvovirus B19(PVB19)細小病毒B19 LAMP試劑盒 

1123837-84-2  Sitravatinib  100mg  Guinea Pig Herpes Virus豚鼠皰疹病毒LAMP試劑盒 

1123837-84-2  Sitravatinib  10mg  Cronobacter spp.克羅諾桿菌通用LAMP試劑盒 

1123837-84-2  Sitravatinib  200mg  Clonorchis sinensis中華枝睪吸蟲LAMP試劑盒 

1123837-84-2  Sitravatinib  50mg  Guinea Pig Herpes Virus豚鼠皰疹病毒LAMP試劑盒
癌細胞;MDA-MB-231頭孢克1Cefixime質量規格:>98%,BR

KLK3 Others Human  KLK3 / PSA / Kallikrein-3 細胞裂解液 (陽性對照) NDSB 256(>98%,BR)NDSB 256質量規格:>98%,BR

MT-4 急性母細胞白血病細胞NDSB-211NDSB-211質量規格:BR

A-673 橫紋肌瘤細胞 A-673 rhabdomyoma cells DMEM培養基+10%FBS中性紅染色液Neutral red solution(1X)質量規格:Ind Grade

TDGF1 Protein Human 重組 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標簽)鎳粉(>99.5%,SP)Nickel powder質量規格:>99.5%,SP
小鼠大隱靜脈組織提取物直銷盤羊皮膚細胞;ASHS3 卵巢細胞,Lec1細胞 L7712細胞,615小鼠T細胞性白血病瘤株Fmoc-L-纈氨酸質量規格:>98%,BRFmoc-Val-OH

SV40T轉化的胚腎細胞;293TFmoc-N-三苯-L-天冬酰胺質量規格:>98%,BRFmoc-Asn(Trt)-OH

HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/N05056/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細胞裂解液 (陽性對照) N'-芴甲氧羰基-N-芐氧羰基-L-賴氨酸質量規格:≥98%,BRFmoc-Lys(Z)-OH

CL-03142V6.11(胚腎細胞)5×106cells/瓶×2E-64d,蛋白酶抑制劑,阿洛司他丁質量規格:>98%,BRE64d,E-64d

HA Others H7N7 甲型流感 H7N7 (A/chicken/Netherlands/1/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-脫氧胞苷-5-1酸二鈉鹽質量規格:>98%,BRdCMP,2Na

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