小鼠關節軟骨組織提取物 【Mouse Bone: Normal Articular Cartilage Derivatives】 軟骨主要功能：（1）軟骨是人身體中不會發生癌變的組織。（2）骨骼在發育初期大部分是由軟骨構成的。（3）軟骨一般起到承重負荷，減少關節間骨骼摩擦等作用。公司科技提供來自新鮮或冷凍小鼠關節軟骨組織中高質量的總RNA，PCR準備的第一條cDNA鏈，蛋白質及其亞組分。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆，表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

總RNA制備：利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA，然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備：純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈，以50ul總反應體系進行逆轉錄，體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mg總RNA。68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA，1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析，保證了產品的質量。

蛋白制備：利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液，離心去除組織碎片，通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度，組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF，-80度保存。

潛在的應用： <1>已知基因的PCR克隆；<2>mRNA選擇性剪接；<3>基因克隆與目標測序；<4> Western and Northern Blot；<5>蛋白檢測與蛋白質組學；<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

收到凍存細胞的處理方法：
1.37°C水浴預熱培養基；
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續暖細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清，加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中，輕輕晃勻；
5.置于37°C，5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話，瓶蓋不要擰太緊)；
6.第二天，用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。

實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養，而不適用于懸浮細胞培養，懸浮細胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造，并經過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態一致的細胞，可以使用較大的培養皿，但不宜過大，以避免培養液的浪費和增加污染機率； 
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；
5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1119-97-7  MitMAB  50mg  Staphylococcus chromogenes產色葡萄球菌LAMP試劑盒 

1120-02-1  OctMAB  10mg  Staphylococcus capitis頭狀葡萄球菌LAMP試劑盒 

1120-02-1  OctMAB  50mg  Staphylococcus capitis頭狀葡萄球菌LAMP試劑盒 

112014-15-0  2-thio-Acetyl MAGE  10mg  Staphylococcus arlettae阿爾萊特葡萄球菌LAMP試劑盒 

112014-15-0  2-thio-Acetyl MAGE  1mg  Staphylococcus haemolyticus溶血葡萄球菌LAMP試劑盒
肺癌細胞;A549 [A-549] 腦成纖維細胞*培養基 100mL5-O-去奧美拉唑硫化物5-O-Desmethyl Omeprazole Sulfide質量規格：美國進口

肝竇內皮細胞cDNAHHSEC cDNA奧美拉唑 Omeprazole質量規格：>99%,USP33,BR,可用于細胞培養

小鼠胚胎成纖維細胞(MEF-mt)(5×105)奧美拉唑 （標準品）Omeprazole質量規格：HPLC>98%,標準品

大鼠肝細胞;IAR20氯唑沙宗Chlorzoxazone質量規格：>98.5%,BR

小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2 小鼠肝外膽管上皮細胞*培養基 100mL氯唑沙宗（標準品）Chlorzoxazone質量規格：HPLC>98%,標準品
小鼠關節軟骨組織提取物 直銷星形膠質細胞 (HA) (1×106 ) 小鼠皮層神經膠質細胞(EGFP標記) Mouse釩標準溶液(100mg/L,基體:1%HCI)質量規格：100mg/L,基體:1%HCIVanadium standard

CM-H073膀胱成纖維細胞*培養基100mL鐿標準溶液(1000μg/ml)質量規格：1000μg/mlYtterbium standard

TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 AIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 細胞裂解液 (陽性對照) 地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷質量規格：>99.5%,BR,可用于細胞培養Decitabine

成纖維母細胞-新生HDF-n地西他濱/ 5-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Decitabine

RWPE-1細胞，正常前列腺上皮細胞 小鼠B細胞雜交瘤細胞,SH3細胞 成纖維細胞培養基-2(用于心肌成纖維細胞)FM-25-氮雜-2'-脫氧胞嘧啶核苷質量規格：>97%,進分sigma貨號A3656 5-Aza-2′-deoxycytidine
注意事項：
1.接收到細胞，肉眼觀察細胞培養基顏色
，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。