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當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞培養>>細胞,組織提取物>> T25m2小鼠成年表皮角質形成層細胞提取物直銷

小鼠成年表皮角質形成層細胞提取物直銷

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具體成交價以合同協議為準

產品型號T25m2

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所  在  地上海市

更新時間:2021-06-21 11:27:59瀏覽次數:170次

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小鼠成年表皮角質形成層細胞提取物直銷如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1 HBV HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

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小鼠成年表皮角質形成層細胞提取物直銷

T25m2

CS-964117

小鼠成年表皮角質形成層細胞提取物【Mouse Skin: Normal Epidermal Keratinocytes Derivatives】小鼠成年表皮角質形成層細胞提取物是從小鼠原代成年表皮角質形成層細胞提取的,小鼠原代成年表皮角質形成層細胞從正常小鼠皮膚組織制備。所有的產品在發貨之前均經過嚴格的QA/QC流程以確保其質量。這些產品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學實驗的研究。

RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結果等。

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應體系進行逆轉錄,體系中包括MMLV反轉錄酶和隨機引物以及10mgRNA68℃反應10min 后終止RT反應。利用1x RT Buffer 運輸cDNA1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應。所有cDNA產品在訂單發貨之前都經過了嚴格的QA/QC分析,保證了產品的質量。

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備人關節軟骨組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。

潛在的應用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot<5>蛋白檢測與蛋白質組學;<6>芯片研究與表達圖譜。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37,5%CO2  培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37,5%CO2  培養114616-31-8  5(6)-SFX (Fluorescein), SE  10mg  Corynebacterium ulcerans潰瘍棒桿菌LAMP試劑盒 

114627-30-4  (Des-Gly)-Glutathione-monoethyl ester (reduced)  1g  Corynebacterium renale牛腎盂腎炎棒桿菌LAMP試劑盒 

114627-30-4  (Des-Gly)-Glutathione-monoethyl ester (reduced)  250mg  Corynebacterium ulcerans潰瘍棒桿菌LAMP試劑盒 

1146594-87-7  JNJ-40418677  10mg  Corynebacterium pseudotuberculosis偽結核棒桿菌LAMP試劑盒 

1146594-87-7  JNJ-40418677  1mg  Corynebacterium renale牛腎盂腎炎棒桿菌LAMP試劑盒
marc-145-EGFP-puro(慢病毒構建穩定株)猴胚胎腎上皮細胞 Marc-145-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin1,4,5,8-萘四甲酰基二(>97.0%(N))1,4,5,8-Naphthalenetetracarboxdiimide質量規格:>97.0%(N)

PDGFC Protein Human 重組 PDGF-C 蛋白 (Fc 標簽)3,4,9,10-苝四甲酰二亞胺(>95.0%(N))3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Diimide質量規格:>95.0%(N)

氣管上皮細胞(HTEpiC)(5×105 ) MN-h, 小鼠海馬神經元 Mouse9,10-(1-萘基)(>98.0%(HPLC))9,10-Di(1-naphthyl)anthracene質量規格:>98.0%(HPLC)

貓腎細胞;CRFK2,3,6,7,10,11-(己氧基)苯并菲(>98.0%(HPLC))2,3,6,7,10,11-Hexakis(hexyloxy)triphenylene質量規格:>98.0%(HPLC)

CALR Others Human  CALR / Calreticulin 細胞裂解液 (陽性對照) 二萘嵌苯(>98.0%(GC))Perylene質量規格:>98.0%(GC)
小鼠成年表皮角質形成層細胞提取物直銷SK-MEL-1(皮膚色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 V79(中國倉鼠肺細胞)L-天門冬氨酸鉀質量規格:>99%,BRL-Aspartate Potassium

CL-0036BRL-3A(大鼠正常肝細胞)5×106cells/瓶×2輔酶Q10,泛醌質量規格:>98%,BRCoenzyme Q10,Ubiquinone

DCBLD1 Others Human  Discoidin / DCBLD1 細胞裂解液 (陽性對照) 輔酶Q10(標準品)質量規格:HPLC98%,標準品Coenzyme Q10

多聚賴氨酸 1 mg/mlPLL維生素A醋酸酯(標準品)質量規格:HPLC99%,標準品vitamin A acetate

Ovary細胞,卵巢癌細胞 兔成骨C細胞,IF細胞 胎盤滋養層細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)依澤替米貝β-D-葡萄糖苷酸質量規格:美國進口Ezetimibe β-D-Glucuronide
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優質胎牛血清,10%
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養箱濕度為70%-80%
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。

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