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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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流感嗜血桿菌熒光PCR法檢測試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-07-15 21:13:09瀏覽次數(shù):143次

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流感嗜血桿菌熒光PCR法檢測試劑盒客戶只需提供樣品和待檢測名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報告給您。

具有下列特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。

產(chǎn)品名稱

流感嗜血桿菌熒光PCR法檢測試劑盒

規(guī)格

50T

貨號

CP99509

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個循環(huán),通過多次循環(huán)反應(yīng),使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。
其主要步驟是:
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下(通常為93-94)使其變性解成單鏈;
人工合成的兩個寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,兩個引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短;
耐熱的DNA聚合酶(Taq酶)在72將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,以目的基因?yàn)槟0鍙?/span>5’→3’方向延伸,合成DNA的新互補(bǔ)鏈。

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特點(diǎn)優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%
2.   重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%
3.   靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實(shí)現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6.   優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
引物擴(kuò)增跨度: 200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC最好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列最好有適宜的酶切位點(diǎn), 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.11umol10100pmol,以引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
109008-28-8  Mauritianin  5mg  New Delhi Metallo-beta-Lactamase-1 Bacteria (NDM-1Superbug)新德里超級細(xì)菌LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

109024-47-7  β-Bag Cell Peptide (Aplysia californica)  1mg  Enteric Adenovirus腸道腺病毒41LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

109028-10-6  CGS 12066B dimaleate  10mg  Enteric Adenovirus腸道腺病毒41LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

109028-10-6  CGS 12066B dimaleate  50mg  Adeno-associated Virus(AAV)腺伴隨病毒LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20

109053-20-5  Fmoc-His(Boc)-OPfp  1g  Adeno-associated Virus(AAV)腺伴隨病毒LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒  50  低溫  負(fù)20
鹽酸丙哌維林(標(biāo)準(zhǔn)品)Propiverine 質(zhì)量規(guī)格:含量測定  Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISAKit大鼠受體(M-AChR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  人鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

氨標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:水)Ammonia solution質(zhì)量規(guī)格:1000μg/ml,溶劑:  DNA狹縫雜交(SLOTBLOT)試劑盒小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)試劑盒 Mouse Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit

酰嘧磺隆(標(biāo)準(zhǔn)品)Amidosulfuron質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品  MouseProgesterone,PROGELISA試劑盒小鼠孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  纖連蛋白(FN)ELISA試劑盒 ,英文名: FN ELISA Kit

莠滅凈(標(biāo)準(zhǔn)品)Ametryn質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98.8%  小鼠硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2(TBP2)ELISA試劑盒 ,英文名: TBP2 ELISA Kit  MouseLactoferrin,LTF/LFELISA試劑盒小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
流感嗜血桿菌熒光PCR法檢測試劑盒FETUB Others Mouse 小鼠 FETUB / Fetuin-B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 染料木素/金雀異黃酮質(zhì)量規(guī)格:≥98%,BRGenistein

SV40T轉(zhuǎn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞;PUMC-HUVEC-T1染料木素/金雀異黃酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品Genistein

EPHA4 Others Human EphA4 / HEK8 (aa 570-986) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 三特丁基膦(1.0 M in )質(zhì)量規(guī)格:1.0 M in Tri-tert-butylphosphine

CL-0380MDA-MB-157(人癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2吡螨胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品Tebufenpyrad

NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系 人腎癌WilmsG-401細(xì)胞 NCI-H1869 [H1869](人肺癌細(xì)胞)萘乙酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品1-Naphthaleneacetamide
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
兩相分離 1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530孵育23分鐘。412000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530孵育10分鐘后,于412000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,47000rpm離心5分鐘。
RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

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