使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產品跟市場上絕大多數核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
參數規格：

產品名稱：轉基因品系玉米CBH-351染料法qPCR試劑盒
貨號:CP97280
產品規格：50T
產品運輸：低溫運輸
產品保存：-20℃保存
產品有效期：一年
運輸：低溫
注意事項：1．基礎程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應時間；4．循環次數；5．PCR 反應液的配制；6．PCR技術的基本原理；7．PCR的反應動力學；8．PCR擴增產物；9．PCR反應體系與反應條件。

PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質粒載體上，構建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴增檢測的標準品，并將所得標準品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標準曲線。
其中所述參照基因為本領域常規參照基因，較佳地管家基因，優選地為RPPH1的擴增區域，其中所述質粒載體為本領域常規質粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標準品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標準品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標準曲線法應用中目的基因與參照基因的濃度比例關系難以控制的問題，提高HER2基因擴增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標準品經同步進行實時熒光定量PCR擴增后，目的基因與參照基因按照各自的標準曲線計算各自的拷貝數，計算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數比值，即得目的基因的拷貝數相對定量檢測結果。
其中所述待測目的基因為本領域常規待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴增區域，所述熒光定量PCR擴增為本領域常規熒光定量PCR擴增方法，所述熒光定量PCR擴增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴增。
?實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下是轉基因品系玉米CBH-351染料法qPCR試劑盒公司正在熱銷的產品：
anti- GAS6 antibody資源名稱日本絲孢酵母種屬:Trichosporon│japonicum分離基物:生物樣/闊苞菊/葉提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:近海酵母培養方法培養基:513

anti- GAS7 antibody資源名稱解脂耶羅維亞酵母種屬:Yarrowia│lipolytica分離基物:生物樣/紅海欖/枝提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:近海酵母培養方法培養基:513

anti- GAS8 antibody資源名稱金色隱球酵母種屬:Cryptococcus│aureus分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養物安全等級:1模式菌株:no應用領域:生物轉化微生物/蛋白含量高培養方法培養基:513

anti- Gastrin antibody資源名稱土微球菌種屬:Micrococcus│terreus分離基物:沉積物/多管沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:未檢測到果膠酶、酪蛋白酶、纖維素酶、淀粉酶、瓊脂酶，檢測到過氧化氫酶培養方法培養基:471生長條件:30℃

anti- Gastrokine 1 antibody資源名稱外硫紅螺菌種屬:Ectothiorhodospira│sp.分離基物:水樣/鹽場表層泥水提供形式:其它安全等級:1模式菌株:no應用領域:微生物/耐鹽堿菌培養方法培養基:1004

anti- Gastrokine 1 antibody資源名稱黑海弧菌種屬:Vibrio│ponticus分離基物:水樣/海水提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:科研參考菌株培養方法培養基:471

anti- GATA1 antibody資源名稱地中海弧菌種屬:Vibrio│mediterranei分離基物:沉積物/海洋沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:471

anti- GATA1 antibody資源名稱苯基桿菌種屬:Phenylobacterium│sp.分離基物:水樣/上層海水提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:海洋可培養細菌多樣性研究培養方法培養基:511

anti- GATA2 antibody資源名稱變異白蟻菌種屬:Isoptericola│variabilis分離基物:沉積物/重力活塞取樣提供形式:斜面培養物模式菌株:no應用領域:海洋放線菌培養方法培養基:471生長條件:28℃

anti- GATA3 antibody資源名稱堆肥假單胞菌種屬:Pseudomonas│composti分離基物:土壤/表層土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:微生物/土壤耐鹽菌培養方法培養基:1001

anti- GATA3 antibody資源名稱芽孢桿菌(加詞待譯)種屬:Bacillus│neizhouensis分離基物:沉積物/深灰色沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:微生物/耐堿菌(pH11)培養方法培養基:821生長條件:25℃

anti- GATA4-Specific antibody資源名稱新金色分枝桿菌種屬:Mycobacterium│neoaurum分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:生物活性微生物/抗腫瘤活性培養方法培養基:471生長條件:28℃

anti- GATA5 antibody資源名稱淀粉酶鏈霉菌種屬:Streptomyces│diastaticus分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:生物活性微生物/抗腫瘤活性；產酶微生物/產蛋白酶；培養方法培養基:12生長條件:28℃

anti- GATA6 antibody資源名稱反硝化卡斯特蘭尼氏菌種屬:Castellaniella│denitrificans分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養物模式菌株:no應用領域:潛在的有機污染物降解菌/分離自苯酚降解菌群培養方法培養基:33生長條件:28℃

anti- GATAD2B antibody資源名稱鯉鏈霉菌種屬:Streptomyces│carpaticus分離基物:土壤/近海紅樹林土壤提供形式:斜面培養物模式菌株:no應用領域:可用于抗菌活性及抗腫瘤活性研究培養方法培養基:12生長條件:28℃

anti- GATC antibody資源名稱食溶劑副球菌種屬:Paracoccus│solventivorans分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養物模式菌株:no應用領域:有機污染物降解菌/（潛在的）苯酚降解菌培養方法培養基:33生長條件:28℃

anti- GATM antibody資源名稱奧斯陸莫拉氏菌種屬:Moraxella│osloensis分離基物:沉積物/養魚池底泥提供形式:凍干物模式菌株:no應用領域:潛在的反硝化菌/以硝酸根為電子受體分離，可用于生物脫氮研究； 產酶微生物/脂酶（三丁酸甘油酯）培養方法培養基:33生長條件:28℃

anti- GBA antibody資源名稱硝酸鹽還原遠洋桿菌種屬:Pelagibacterium│nitratireducens分離基物:水樣/表層海水提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:大洋細菌培養方法培養基:471
轉基因品系玉米CBH-351染料法qPCR試劑盒大鼠 eNOS/NOS3 Human OAT(Ornithine aminotransferase, mitochondrial) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 ECE2 Human PRG2(Bone marrow proteoglycan) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 ECE1 Human DPP3(Dipeptidyl peptidase 3) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 ETR-A Human RPS19(Ribosomal protein S19) ELISA Kit18.75pg/ml31.25-2000pg/ml

大鼠 ET-1 Human SIGLEC10(Sialic acid-binding Ig-like lectin 10) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 EG-VEGF Human RXRB(Retinoic acid receptor RXR-beta) ELISA Kit0.469ng/ml0.78-50ng/ml

大鼠 ET Human NR1I2(Nuclear receptor subfamily 1 group I member 2) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml