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上海莼試生物技術有限公司
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人腎癌成纖維細胞鑒定試劑盒說明

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號T25m2

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-18 16:12:59瀏覽次數:221次

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人腎癌成纖維細胞鑒定試劑盒說明收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

我公司提供原代細胞、細胞系、細胞株和菌種,細胞庫管理規范,提供的細胞株背景清楚,提供參考文獻和*培養條件。純度可達 90%以上,且不含有 HIV-1 HBV HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

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產品名稱

規格

貨號

人腎癌成纖維細胞鑒定試劑盒說明

T25m2

CS-963691

描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
      發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
      保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
細胞處理:
1 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3.6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

細胞處理方法:
以下細胞處理方法及細胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據到貨時細胞密度,細胞生長狀態等具體情況,酌情處理,如需要更詳細技術指導,請及時電話或郵件聯系。
一.貼壁細胞
客戶接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
顯微鏡觀察細胞,當細胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細胞應該在37度培養箱預溫1-2h后再做處理。如未達到細胞傳代密度,培養瓶應預留一部分培養基繼續培養。
嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細胞,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
1000rpm,5min離心,重懸細胞。換新的細胞培養瓶,37,5%CO2  培養。
二.懸浮細胞
1. 接收到細胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養瓶外部。
2. 肉眼觀察細胞培養基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X ,200X 各一張)。
3. 嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4. 將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒)。
5. 1000rpm,5min離心,重懸細胞。 換新的細胞培養瓶和新鮮培養基,37,5%CO2  培養7369-94-0  (H-Cys-Tyr-OH)2  250mg  Fructus litseae蓽澄茄LAMP鑒定試劑盒 

18814-49-8  Boc-Ala-D-Glu(OBzl)-NH2  1g  Fructus litseae蓽澄茄LAMP鑒定試劑盒 

123952-20-5  H-Tyr-Thr-NH2  250mg  Fructus piperis longi蓽茇LAMP鑒定試劑盒 

42002-05-1  Boc-His-NHNH2  25g  Fructus piperis longi蓽茇LAMP鑒定試劑盒 

13139-27-0  Z-Ala-NH2  25g  Radix glehniae北沙參LAMP鑒定試劑盒
5-Formyl-2-furylboronic acid  27329-70-0  中文名:  分子式:C5H5BO4  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠高鐵血紅蛋白(MHB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

5-Formamide-1-(2-formyloxyethl)pyrazole  116856-18-9  中文名:  分子式:C7H9N3O3  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠骨退化特異標志物(CTX-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

5-Fluorouracil  51-21-8  中文名:  分子式:C4H3FN2O2  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠抗透明帶抗體elisa試劑盒   小鼠抗透明帶抗體試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠抗透明帶抗體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠抗透明帶抗體試劑盒、小鼠抗透明帶抗體eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

5'-Deoxy-5-fluorocytidine  66335-38-4  中文名:  分子式:C9H12FN3O4  度:99.0%      小鼠抗平滑肌抗體elisa試劑盒   小鼠抗平滑肌抗體試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠抗平滑肌抗體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠抗平滑肌抗體試劑盒、小鼠抗平滑肌抗體eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。

5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  24065-33-6  中文名:  分子式:C5H3ClO2S  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠抗凝血酶受體elisa試劑盒   小鼠抗凝血酶受體試劑盒   規格型號:96T/48T   小鼠抗凝血酶受體試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:小鼠抗凝血酶受體試劑盒、小鼠抗凝血酶受體eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。
人腎癌成纖維細胞鑒定試劑盒說明1017606-66-4  LPA2 antagonist 1  10mM*1mLinDMSO  Fructus hordei germinatus麥芽染料法PCR鑒定試劑盒 

1017606-66-4  LPA2 antagonist 1  2mg  Fructus viticis蔓荊子染料法PCR鑒定試劑盒 

1017606-66-4  LPA2 antagonist 1  50mg  Radix ophiopogonis麥冬染料法PCR鑒定試劑盒 

1017606-66-4  LPA2 antagonist 1  5mg  Fructus viticis蔓荊子染料法PCR鑒定試劑盒 

10176-66-6  Nevadensin  10mg  Radix ephedrae麻黃根染料法PCR鑒定試劑盒

細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優質胎牛血清,10%
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養箱濕度為70%-80%
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1213的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。

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