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上海莼試生物技術有限公司
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人結腸癌組織源細胞鑒定試劑盒說明

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號T25m2

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-17 16:49:45瀏覽次數(shù):135次

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人結腸癌組織源細胞鑒定試劑盒說明收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
      發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
      保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。

產(chǎn)品名稱

人結腸癌組織源細胞鑒定試劑盒說明

規(guī)格

T25m2

貨號

CS-963675

收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養(yǎng)基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續(xù)暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養(yǎng)基重懸細胞后轉入T25培養(yǎng)瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)(培養(yǎng)瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊)
6.第二天,用新鮮的培養(yǎng)基給細胞換液后繼續(xù)培養(yǎng)。

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37 5CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min
2PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
6422-35-1  Z-Gly-Gly-NH2  25g  Rhizoma atractylodis macrocephalae 白術LAMP鑒定試劑盒 

45159-25-9  H-Ala-D-Glu-NH2  1g  Rhizoma atractylodis macrocephalae 白術LAMP鑒定試劑盒 

21141-84-4  (H-Cys-Val-OH)2  1g  Radix angelicae dahuricae白芷LAMP鑒定試劑盒 

62130-80-7  (H-Cys-Phe-OH)2  1g  Radix angelicae dahuricae白芷LAMP鑒定試劑盒 

20898-21-9  (H-Cys-Ala-OH)2  1g  Cortex dictamni白鮮皮LAMP鑒定試劑盒
5-Aminofluorescein  3326-34-9  中文名:5-氨基熒光素  分子式:C20H13NO5  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

5-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  119-79-9  中文名:5-氨基-2-萘磺酸  分子式:C10H9NO3S  度:98.0%      小鼠血小板膜糖蛋白Ⅱba(GP-ba/CD41+CD61)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

5-Amino-2-methylindole  7570-49-2  中文名:5-氨基-2-吲哚  分子式:C9H10N2  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

5-Amino-1-naphthol  83-55-6  中文名:5-氨基-1-萘酚  分子式:C10H9NO  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠低密度脂蛋白復合物(LDL-IC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

5-Amino-1-(2-hydroxyethyl)pyrazole  73616-27-0  中文名:  分子式:C5H9N3O  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T
人結腸癌組織源細胞鑒定試劑盒說明10179-57-4  MLS-573151  25mg  Fructus liquidambaris路路通染料法PCR鑒定試劑盒 

10179-57-4  MLS-573151  5mg  Fructus momordicae羅漢果染料法PCR鑒定試劑盒 

1018069-81-2  TG 100801 Hydrochloride  10mg  Rhizoma phragmitis蘆根染料法PCR鑒定試劑盒 

1018069-81-2  TG 100801 Hydrochloride  50mg  Radix rhapontici漏蘆染料法PCR鑒定試劑盒 

1018069-81-2  TG 100801 Hydrochloride  5mg  Rhizoma phragmitis蘆根染料法PCR鑒定試劑盒
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,375%CO2培養(yǎng)。

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