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上海莼試生物技術有限公司
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小鼠肺泡上皮細胞鑒定試劑盒操作

參  考  價面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號T25m2

品       牌

廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-06-17 14:45:10瀏覽次數:246次

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小鼠肺泡上皮細胞鑒定試劑盒操作收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

 描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
      發貨:客戶可根據自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養瓶和相應的細胞密度。發貨的新鮮細胞還包含:1、發貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養基;2、說明書及注意事項;3、售后服務標準。
      保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。

產品名稱

小鼠肺泡上皮細胞鑒定試劑盒操作

規格

T25m2

貨號

CS-963552

收到凍存細胞的處理方法:
1.37°C水浴預熱培養基;
2.從液氮中取出細胞迅速放入37°C水浴快速解凍(解凍后不要繼續暖細胞);
3.在超凈臺中加入5ml培養基重懸細胞,1000rpm離心5min
4.棄上清,加入5ml培養基重懸細胞后轉入T25培養瓶中,輕輕晃勻;
5.置于37°C5% CO2培養箱中培養(培養瓶蓋沒有透氣孔的話,瓶蓋不要擰太緊)
6.第二天,用新鮮的培養基給細胞換液后繼續培養。

實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃制造,并經過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養:
1、無菌條件下,取出1-3d SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4放置;
3、剩下的組織再加入34mL酶消化液,混懸10s,置37消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10 FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37 5CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min
2PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4條件下,用0.1Triton X-100透膜15min
3PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4冰箱中孵育細胞過夜;
5PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37條件下放置1h
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1968/5/4  3,3'-Diindolylmethane  10mM(in1mLDMSO)  Mouse Parvovirus(MPV)小鼠細小病毒染料法熒光定量PCR試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)

1968/5/4  3,3'-Diindolylmethane  100mg  Mouse Parvovirus(MPV)小鼠細小病毒PCR試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)

1968/5/4  3,3'-Diindolylmethane  1g  雙染料三靶點LAMP檢測試劑盒  定做種屬檢測試劑盒  48  低溫  -20

1969/5/6  Quinacrine 2HCl  10mM(in1mLDMSO)  SARS-CoV-2Orf1ab-N片段RT-LAMP試劑盒  動物病原微生物檢測(科研用)

1969/5/6  Quinacrine 2HCl  50mg  SARS-CoV-2Orf1ab-N片段探針法熒光定量RT-PCR試劑盒(CDC方法)  動物病原微生物檢測(科研用)
Pioglitazone   112529-15-4  中文名:鹽酸吡格列酮  分子式:C19H21ClN2O3S  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠內皮細胞生長因子D   英文名稱:   vascuiar endothelial growth factor D   規格:   48T/96T   英文縮寫:   VEGF-D

Pilosol A  501086-15-3  中文名:  分子式:C13H12O  度:關鍵詞:    小鼠內皮細胞生長因子受體1   英文名稱:   vascuiar endothelial growth factor receptor 1   規格:   48T/96T   英文縮寫:   VEGF-R1

Pidotimod  121808-62-6  中文名:匹多莫德  分子式:C9H12N2O4S  度:98.0%  關鍵詞:    小鼠內皮生長因子受體 -1(mouse VEGF-R1)   作用:   ELISA   規格:   96T   美國 R&D

Physapruin A  155178-03-3  中文名:  分子式:C28H38O7  度:96.5%  關鍵詞:  毒性; 酸漿屬; 植物提取物; 天然產物; 天然產物庫  小鼠內皮生長因子受體 2(mouse VEGF-R2)   作用:   ELISA   規格:   96T   美國 R&D

Physaminimin C  1582259-03-7  中文名:  分子式:C28H38O8  度:98.0%  關鍵詞:    大鼠Active Caspase-3   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝
小鼠肺泡上皮細胞鑒定試劑盒操作100130-32-3  VUF 8430 dihydrobromide  10mg  Radix gentianae macrophyllae秦艽探針法PCR鑒定試劑盒 

100130-32-3  VUF 8430 dihydrobromide  50mg  Radix gentianae macrophyllae秦艽探針法PCR鑒定試劑盒 

1001350-96-4  BMS-754807  100mg  Semen euryales芡實探針法PCR鑒定試劑盒 

1001350-96-4  BMS-754807  10mM(in1mLDMSO)  Rhizoma et radix notopterygii羌活探針法PCR鑒定試劑盒 

1001350-96-4  BMS-754807  25mg  Semen euryales芡實探針法PCR鑒定試劑盒
注意事項:
1.接收到細胞,肉眼觀察細胞培養基顏色
,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養基培養細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶,375%CO2培養。

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