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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)50T

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-06-09 10:17:02瀏覽次數(shù):130次

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星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒產(chǎn)品特性: 高特異性:本產(chǎn)品采用熱啟動(dòng) DNA 聚合酶,90℃以上 2min 后具有擴(kuò)增活性,可大大提高 PCR 產(chǎn)物的特 異性。 靈敏度:本產(chǎn)品包含的優(yōu)化的緩沖液可檢測(cè)低拷貝數(shù)的模板,且重復(fù)性好。 高適用性:本產(chǎn)品可適用于任意熒光定量 PCR 儀。

?儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),產(chǎn)品僅用于科研請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí),由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。

產(chǎn)品名稱

星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒

英文名稱

Nocardia asteroides

貨號(hào)

CP914647

 


相對(duì)定量簡(jiǎn)介:
分析方法: ①雙標(biāo)曲法 ②2 - △Ct ③2 - △△Ct ④Pfaffi法
①雙標(biāo)準(zhǔn)曲線法簡(jiǎn)介
公式:
優(yōu)點(diǎn):分析簡(jiǎn)單,實(shí)驗(yàn)優(yōu)化簡(jiǎn)單
缺點(diǎn):對(duì)每一個(gè)基因,每一輪實(shí)驗(yàn)都必需做標(biāo)準(zhǔn)曲線;必需有固定的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;這些標(biāo)準(zhǔn)品并不代表樣品擴(kuò)增的真實(shí)狀態(tài)應(yīng)用:基因表達(dá)調(diào)控研究中與*的兩種相對(duì)定量方法之一

實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
3:結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
熒光定量PCR檢測(cè)方法包括以下步驟:
(1)產(chǎn)品僅用于科研將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線;
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為:將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接,克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上,構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品,并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因,較佳地管家基因,優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域,其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體,較佳地為PCR克隆載體,優(yōu)選地為TA cloning載體,所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1:1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1,解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題,提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為:待測(cè)樣本與步(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后,目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù),計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值,即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因,較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因,更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域,所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法,所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增,更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
樣品要求及注意事項(xiàng):
1、 如果提供實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)材料必須保證新鮮,請(qǐng)您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運(yùn)輸。
2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動(dòng)植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動(dòng)植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
3、 如果提供RNA或cDNA我們要對(duì)您提供的材料進(jìn)行評(píng)估。
4、 實(shí)時(shí)熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。

骨化醇標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Ergocalciferol (Vitamin D2)  :50-14-6

氟哌噻噸標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Equilin  :474-86-2

酒石腎上腺素標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Epinephrine Bitartrate  :51-42-3

表乳標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Epilactose  :50468-56-9

恩他卡朋相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Entacapone Related Compound A  :145195-63-7

恩他卡朋標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Entacapone  :130929-57-6

恩諾沙星標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Enrofloxacin  :93106-60-6

恩氟烷標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Enflurane  :13838-16-9

馬來依那普利標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Enalapril Maleate  :76095-16-4

恩曲他濱標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Emtricitabine  :143491-57-0

富馬依美斯汀標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Emedastine Difumarate  :87233-62-3

刺五加甙E標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Eleutheroside E  :96038-87-8

紫丁香酚甙標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Eleutheroside B  :118-34-3

依法韋侖標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Efavirenz  :154598-52-4

依酚氯銨標(biāo)準(zhǔn)品  英文名稱:Edrophonium Chloride  :116-38-1

PASE-3蛋白免疫共沉淀分析試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:5次

PASE-3蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:25次

 細(xì)胞PASE-4蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

載玻片細(xì)胞PASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

冰凍切片組織PASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

石蠟切片組織PASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

 載玻片細(xì)胞PASE-4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

 冰凍切片組織PASE-4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

 石蠟切片組織PASE-4蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:10/20次

 細(xì)胞PASE-4蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒  進(jìn)口/國產(chǎn)  規(guī)格:10/50 次
星狀諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒Sunxiuqinia│roseum sp. nov.資源名稱玫瑰色孫修琴菌分離基物:海膽人GCA ELISA試劑盒

Pseudomonas chlororaphis subsp.aurantiaca資源名稱綠針假單胞菌橙色亞種分離基物:植物根際土壤人GDH/GLDH ELISA試劑盒

Spiribacterhalophilasp.nov.資源名稱嗜鹽螺旋桿菌分離基物:海泥人HCⅡ ELISA試劑盒

Sporosarcinaluteola資源名稱淺黃色芽胞八疊球菌分離基物:醬油生產(chǎn)設(shè)備的表面人CA ELISA試劑盒

Verticillium lecanii資源名稱蠟蚧輪枝孢菌(斜面)提供形式:試管斜面人Hp-IgG ELISA試劑盒

Sporosarcina koreensis資源名稱朝鮮芽孢八疊球菌分離基物:土壤,韓國水原市人GGT  ELISA試劑盒

Sphingomonasyantirgensis資源名稱Sphingomonasyantirgensis分離基物:紫色土人GM ELISA試劑盒

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