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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>PCR檢測試劑盒>>熒光定量PCR>> 50次海魚分枝桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒

海魚分枝桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒

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產(chǎn)品型號50次

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-08-17 14:11:42瀏覽次數(shù):156次

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海魚分枝桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。最好在專門的區(qū)域操作。

產(chǎn)品特點:

高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:海魚分枝桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品分類:熒光定量PCR
貨號:CP101165
產(chǎn)品規(guī)格:50
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20保存
產(chǎn)品有效期:一年儲存條件:
14
或-20樣品收集、處理及保存方法
1.
血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2.
血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3.
細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4.
組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5.
保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix 
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
 2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl      
ddH2O 50 μl  
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2
:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93 40s →58 30s → 72 60s,循環(huán)30-35次,在72 保溫7min
注意事項:
加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物AB液時,避免使用帶金屬部分的加樣器
實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1.
標(biāo)記 6 個離心管,分別為 765432
2.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3.
7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7.
用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8.
如果有 N 個樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.
如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。

特非那定Terfenadine質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR  10%Formalin固著液50毫升  對蝦白斑病毒(WSSV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

維生素C鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) ascorbate質(zhì)量規(guī)格:含量測定  MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISA試劑盒小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  HumanProgesterone,PROGELISA試劑盒人孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

硝酸硫胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Thiamine nitrate質(zhì)量規(guī)格:含量測定  小鼠血小板衍生生長因子B(PDGFB)ELISA試劑盒 ,英文名: PDGFB ELISA Kit  ELISAKitTFR/CD71小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體規(guī)格:48T/96T

α-細(xì)辛腦,細(xì)辛(標(biāo)準(zhǔn)品)alpha-Asarone質(zhì)量規(guī)格:HPLC99%,標(biāo)準(zhǔn)品  兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA檢測試劑盒rabbitmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 96T/48T  HumanCoisolELISAKit人皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙酸-1-萘酯(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR1-Naphthyl acetate  英文名稱MouseCCL26ELISAKit小鼠CCL26規(guī)格:96T/48T  大鼠脂蛋脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA試劑盒 ,英文名: Lp-PLA2 ELISA Kit

二十八烷醇(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR1-Octacosanol  冰凍切片組織衰老特異性β-半乳糖苷酶原位染色試劑盒50  人抗皮膚抗體(ASA)ELISA檢測試劑盒HumanAi-SkinAibody,ASAELISAKit 96T/48T

1-苯基-5-巰基四氮唑(>98.5%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR1-Phenyl-1H-tetrazole-5-thiol  RatEotaxin1ELISA試劑盒大鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T  大鼠白細(xì)胞抗原DR(HLA-DR)試劑盒 Rat leukocyte aigen-DR,HLA-DR ELISA kit

新戊二醇(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR2,2-Dimethyl-1,3-propanediol  小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  CLIAKitfoie-2ELISAKit大鼠含球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪氨酸激酶2規(guī)格:48T/96T
海魚分枝桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒柱式軟骨RNA提取試劑盒

柱式無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA提取試劑盒

Masson三色染色試劑盒


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