細胞培養(yǎng)處于旺盛增殖期后,消耗了培養(yǎng)基中的營養(yǎng),產(chǎn)生的細胞代謝產(chǎn)物對細胞繼續(xù)增殖產(chǎn)生不利影響,因此需要及時更換培養(yǎng)基,這一過程稱為換液。
環(huán)境準備:相對密封、防塵、防菌的無菌室
操作者準備:雙手清潔呈可操作狀態(tài)
物品準備:超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱、95%酒精燈、PBS、(較常用)、10?S(DMEM)(根據(jù)需要)、巴氏吸管、75%酒精棉球罐、廢液缸。
(a)細胞換液步驟:
1. 打開層流,打開層流間和超凈臺的紫外線燈,廢液缸和吸管同時照射;
2. 把水浴鍋調(diào)整到37℃ 并使其穩(wěn)定;
3. 將新鮮培養(yǎng)基放置到水浴鍋中,注意防止水面高于瓶肩,100ml液體保持10分鐘,(200ml液體保持15分鐘,500ml液體保持20分鐘),間或搖動;
4. 著無菌服裝,帽子,口罩和手套
5. 用75%乙醇消毒培養(yǎng)基瓶外壁,放置到超凈臺上;
6. 將細胞培養(yǎng)瓶取出,用75%乙醇棉球消毒瓶底;
7. 用吸管吸棄舊培養(yǎng)基,更換吸管,于非細胞培養(yǎng)面加入新鮮培養(yǎng)基;
8. 記錄實驗過程和細胞培養(yǎng)瓶號。
(b)細胞培養(yǎng)注意事項:
1、全程無菌操作觀念要強;
2、加培養(yǎng)液時,不可直接加到細胞貼壁的面上
F-TESTO 大鼠游離睪酮 規(guī)格: 48T/96T
f-βCG 大鼠游離β絨毛膜* 規(guī)格: 48T/96T
Hp-IgG 大鼠幽門螺旋菌IgG 規(guī)格: 48T/96T
INHBP 大鼠抑制素結(jié)合蛋白 規(guī)格: 48T/96T
INH-B 大鼠抑制素B 規(guī)格: 48T/96T
OSM 大鼠抑瘤素M 規(guī)格: 48T/96T
AChE 大鼠乙酰*酯酶 規(guī)格: 48T/96T
AChRab 大鼠乙酰*受體抗體 規(guī)格: 48T/96T
Ach 大鼠乙酰* 規(guī)格: 48T/96T
ALDH 大鼠乙醛脫氫酶 規(guī)格: 48T/96T
ADH 大鼠乙醇脫氫酶 規(guī)格: 48T/96T
細胞培養(yǎng)
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