許多同學對細胞培養(yǎng)消化做了許多研究，得出了很多有價值的經(jīng)驗，也見到很多人的困惑。其實細胞培養(yǎng)，尤其是細胞系的培養(yǎng)，就消化而言，不是太難，做得多了，善于總結(jié)經(jīng)驗，就能把細胞越養(yǎng)越好。一般的程序步驟，細節(jié)操作，我這里就不講了，只講一些基本操作背后的知識，如果不對之處，歡迎指正，一起討論：
1、其實絕大部分細胞消化的時候是只要用*潤洗一遍即可，吸去*后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量*在37度一般不到2min足夠消化細胞（絕大部分1min不到）。對于這些細胞原則上不要用*孵育細胞，連續(xù)這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，*潤洗吸去，然后37度消化。
2、什么算是消化好了呢？不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了，一般你肉眼觀察貼壁細胞層，只要能移動了，多半呈沙壯移動，其實已經(jīng)可以了，很多人喜歡把細胞消化或者吹打成*分離細胞，這是沒有必要的。一般能移動了，說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了，細胞之間的附著也已經(jīng)消失了，細胞已經(jīng)獨立分布了（雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布）。這個時候應該停止消化，不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好，間隙很大，才停止。細胞就是*成單個細胞懸液，之后在貼壁的過程中仍然會聚集，這個是貼壁培養(yǎng)的細胞，尤其是腫瘤細胞的一個特性，無論死活的細胞都是如此，你可以嘗試，準備的單個細胞懸液，貼壁后觀察細胞，仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此，容易聚集，不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液。
細胞培養(yǎng)細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來，這個時候即使是成片的（比如Calu-3細胞），吹打不超過20次后（一般10次即可），成小規(guī)模聚集（10個細胞左右），是正常的，不要試圖再去延長消化時間，或者象有的同學那樣吹打1h，等待單細胞懸液出現(xiàn)。
100194-200502    含量測定    100mg    *
100195-199701    含量測定    50mg    *
100196-200803    GC法含量測定    1000mg    鄰位甲酚
100197－201002    檢查用    50mg    *
100198－201004    UV法含量測定    100mg    *
100199-201002    含量測定    100mg    *
100200-200202    含量測定    50mg    青*
100201--201003    含量測定    100mg    氫溴酸右*
100203-200503    UV法含量測定    100mg    *
100204-200702    含量測定    100mg    *
細胞培養(yǎng)