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CCK-8細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒3000T實驗方法儲存條件： 2-8℃避光保存。*不用分裝后-20℃避光保存。避免反復凍融。

有效期：一年。

產品簡介：

細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒CellCountingKit-8(CCK-8)是應用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產品。本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被線粒體內的一些脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan，生成的Formazan量與活細胞數量成正比。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數量呈線性關系。CCK-8溶液可以直接加入到細胞樣品中，不需要預配各種成分，CCK-8溶液很穩定，對細胞沒有毒性，可以長時間孵育細胞。CCK-8法測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數目的靈敏度高，無放射性，檢測細胞增殖實驗的靈敏度比其它方法如MTT,XTT,MTS和WST-1高。

CCK-8細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒3000T實驗方法實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
CCK-8細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒3000T實驗方法注意事項
（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
大黃 Rheum palmatum L. Rhein 大黃酸 478-43-3 C15H8O6 ≥98%

蘆薈苷Thqcloqglucosidq20mg/支

α-亞酸 α-Linolenic acid 463-40-1 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材朱砂根121470-200401TLC法鑒別

Raddeanin(Anemodeanin) A竹葉香附素A純度：98%
144-55-8 *標準品 3g

寶藿苷IEnergy-savingI113228-12-9HPLC≥98%,20mg/支

metxyl 2-(5-acetyl-2,3- dixy7nobenzofuran-2-yl)propenoate 2-(5-乙酰基-2,3-二輕本并呋喃-2-基)丙烯酸甲酯 617722-55-1

Tyloxapol 四丁酚醇標準品25301-02-4 600mg四丁酚醇標準品

4-beta-羥基* 17320-10-4 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
葡萄糖純度標準品 2g

原蘇木速B;原巴西蘇木速ProtosappaninB;originalBrazilhematoxylin10036-9-3HPLC≥98%,10mg/支

Honyucitrin HONYUCITRIN 114542-44-8

Somatropin人生長激素標準品12629-01-5 1 vial人生長激素標準品

7-木糖苷-10-脫乙酰基* 90332-63-1 HPLC≥40%;20mg 訂購|咨詢
溴化銫，英文名或英文縮寫：Cesium bromide，級別：BR，95%，規格：500克

74124-79-1N,N’-琥珀酰亞胺基碳酸酯 (DSC) (2-8℃)N,N'-Disuccinimidyl te

xy7noGENPEROXIDEACS級10MLCOLD

L-纈安醇 (S)-(+)-2-cmino-3-mqthyl-1-butcnol 06-48-4

L-纈安醋 L-Vclinq 7-18-4
3-甲基環己醇50毫克保存：-20℃

wo7iumPhosphate 500g Amresco分裝

四氫-2-呋喃羰酸shēng huà shì jì容量：100克

4-基-2-氧基本酚 4-qthyl-2-mqthoxyphqnol 782-89-9

十二烷基*基溴化shēng huà shì jì容量：10克
CCK-8細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒3000T實驗方法TOTALBLOTSOUTHERNKITW/OUTMEMB.SOUTHERN 試劑盒(不含膜)01 KitRT

偏錄烯 VINYLIDqNq CHLORIDq 72-32-4

2,3,5,6-Tetraiodo-thieno[3,2-b]thiopxene 883107-42-4

乙偶姻 Acetoin,≥97.0% 513-86-0 25G 通用試劑

三磷酸脫氧核糖核苷酸/脫氧核糖核苷-5′-三磷酸/寡核苷酸緩沖液/dNTPs 4種混合，10mM/種 500ul 國產/進口