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鞭毛染色試劑盒10ml免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
鞭毛染色試劑盒10ml免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
鞭毛染色試劑盒10ml免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H025人胰腺上皮細胞*培養基100mL
SELE Others Rat 大鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照)
HuTu-80細胞,人十二指腸腺癌細胞 人黑色素瘤細胞,HME2細胞 人肝永生化細胞;THLE-3
人類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN
CD80 Others Human 人 B7-1 / CD80 人細胞裂解液 (陽性對照)
人肺成纖維細胞RNAHPF miRNA5 μg
IGSF8 Others Human 人 PGRL / IGSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)
小香豬皮膚細胞;SSC-S2
LS174T細胞,人結直腸腺癌細胞 人眼脈絡黑色素瘤細胞,MuM-2C細胞 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC
HFL1(人肺成纖維細胞) 5×106cells/瓶×2
TNFRSF9 Others Human 人 4-1BB / CD137 / TNFRSF9 人細胞裂解液 (陽性對照)
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人膀胱平滑肌細胞總RNAHBdSMC tRNA
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA
AR42J細胞,人胰腺細胞 人皮膚成纖維細胞系,BJ細胞 小鼠神經母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]
HT-29(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Gibco 17105041 *Dispase II, powder 5 g
大鼠腫瘤壞死因子受體相關因子6(TRAF-6)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管生長素(ANG)免疫試劑盒 Human Angiogenin,ANG ELISA Kit
人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA試劑盒 ,英文名: ABM-Ab ELISA Kit
RatInterleukin23,IL-23ELISA試劑盒大鼠白介素23(IL-23)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISA試劑盒人葡萄糖6磷酸異構酶(GPI)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanIntestinaltrefoilfactor,ITFELISAKit人腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠多巴胺(DA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat visfatin / visfatin (visfatin) ELISA Kit 大鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)ELISA試劑盒
HumanThromboxaneA2,TX-A2ELISAKit 人血栓素A2(TX-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAquaporin3,AQP-3ELISA試劑盒人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒規格:96T/48T
植物乙酰輔酶A羧化酶(ACETYL-COACARBOXYLASE)活性比色法定量檢測試劑盒20次
HumanThyroxine-BindingGlobulinAssay,TBGELISAKit人甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒規格:96T/48T
鞭毛染色試劑盒10ml免費代測兔子α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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