Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒250T使用說明書注意事項

（1）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內用顯微鏡觀察；
（4）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在4℃下操作，以免影響細胞狀態。
（5）在細胞洗滌的后一步，請盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會影響實驗結果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時內進行流式檢測。
（7）PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒250T使用說明書儲存條件： 2-8℃避光保存。

有效期：一年。

產品簡介：

細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒是應用新型的氧化還原指示劑阿爾瑪藍快速高靈敏度檢測細胞增殖和細胞毒性的比色檢測產品。

AlamarBlu是一種氧化還原指示劑，能根據代謝活性產生吸光度變化和熒光信號。其在氧化狀態下呈現紫藍色無熒光性，而在還原狀態下，轉變為呈粉紅或紅色熒光的還原產物，其吸收峰為530-560nm，而散射峰為590nm。在細胞增殖過程中，細胞內NADPH/NADP、 FADH/FAD、 FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，處于還原環境。攝入細胞內的染料被這些代謝中間體及細胞色素類還原后釋放到細胞外并溶于培養基中，使培養基從無熒光的靛青藍變成有熒光的粉紅色。后用普通分光光度計或熒光光度計進行檢測，吸光度和熒光強度與活性細胞數成正比。這種染料經過驗證安全無毒，用于細胞活性和細胞增殖的定量分析以及細胞因子生物測定和體外細胞毒性研究。 這種測定是基于具有代謝活性的細胞將試劑轉換成熒光和比色指示劑的能力。 受損和無活性細胞具有較低的天然代謝活性，因此對應的信號較低。

Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒250T使用說明書實驗操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推；對于細胞懸液每50～100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養液中，稀釋至10uM ，處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失，JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光；而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞，CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同，需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞：
（1）取 10～60 萬細胞，重懸于 0.5mL 細胞培養液中，細胞培養液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細胞。棄上清，注意盡量不要吸除細胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
我司Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒250T使用說明書本著標準*、質量*、服務*、信譽*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網上采購模式！我們將竭誠為您服務,咨詢！
白亮獨活Heracleum candicans Rivulobirin E 237407-59-9 C32H30O11 ≥95%

牡荊速數李糖苷VitqxinrhcmnosidqHPLC≥98%;20mg/支

當歸素;比克芷內酯; 比克芷素 Byakangelicin 19573-01-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

中藥對照藥材火炭母121477-200501TLC法鑒別

(C13:0,C15:1,C17:2,C15:0,C17:1)純度：≥99%
145-42-6 牛磺膽酸鈉標準品 ea

白鮮減BaiXianjian484-9-710mg

4',9,9'-Trixy7noxy-3'-metxoxy- 3,7'-epoxy-4,8'-oxyneolignan 4',9,9'-TRIxy7noXY-3'-metxOXY-3,7'-EPOXY-4,8'-OXYNEOLIGNAN 144881-21-0

標準品 號：15263-52-2 100mg

8-姜酚;8-Gingerol 30462-35-2 20mg 訂購|咨詢
蒲公英 Taraxacum officnala Taraxasterol 蒲公英甾醇 1059-14-9 C30H50O ≥98%

原七葉皂苷元ThqoriginclsqvqnYqZcogcnyucn0823-07-020mg

連翹苷;連翹甙 Phillyrin 487-41-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測定

對照品*130503-200301含量測定

表小檗堿 Epiberberine 1816598 20mg HPLC≥98% 表小檗堿6873-9-2用于含量測定
溴百里酚藍鈉鹽shēng huà shì jì容量：25克

24801-88-5異清酸-3-(三乙氧硅基)丙酯3-Isocyanatopropyltriethoxysilane

5-piperidinothiopxene-2-carbaldehyde 24372-48-3

苯甲酰乙酸乙酯 Cholesteryl stearate,96% 35602-69-8 5G 通用試劑

錄化*(-20℃) Nc
3-羥基酪鹽酸鹽，英文名或英文縮寫：Dopamine xy7nochloride，級別：特純，98.5%，規格：5克

錄化芐;芐基錄;錄penzyl xloni7e;ω-Chlorotolue;1-Chlorometxylbenzene

FLUORESCENTNEXTGEL10%熒光 NEXT 膠, 10%蛋白組學級RTsigma

4-甲氧基苯基溴化 4-Anisyl bromide 13139-86-1 100ML 通用試劑

4-基苯 4-Aminobenzoic acid (≥99.0%) 150-13-0 25G 基酸
Alamar Blue細胞增殖與毒性檢測試劑盒250T使用說明書微量可調八道移液器P50 支 BioHit原裝

Glycinetertbutylesterxy7nochloride鹽酸甘酸叔丁酯5克BR，98%

聚烯亞安 Polyqthylqniminq 2987/6/8

乙基黃原酸鉀/乙基二硫代碳酸鉀/黃酸鉀/乙原磺酸鉀/O-乙基二硫代碳酸酯鉀鹽/乙基二硫化碳酸鉀/O-乙基二硫代碳酸鉀/Potassium ethyl xanthate AR，95%， 100克 國產/進口

法尼醇/法呢醇/3,7,11-*基-2,6,10-十二烷三烯-1-醇/合金歡醇/Farnes