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細菌活性檢測試劑盒-CCK81000T實驗方法

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更新時間:2017-07-03 14:18:10瀏覽次數:306次

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細菌活性檢測試劑盒-CCK81000T實驗方法儲存條件: 2-8℃避光保存。

*不用分裝后-20℃避光保存。避免反復凍融。

有效期: 一年。

產品簡介:

細菌活性檢測試劑盒 (CCK-8) 是應用新型的水溶性四唑鹽2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽快速高靈敏度檢測細菌活性的比色檢測產品。

本四唑鹽在電子載體存在的情況下能夠被細菌的脫氫酶還原成橙黃色的水溶性的Formazan,生成的Formazan量與細菌的活性成正比。細菌活性越強,則顏色越深;細菌活性越弱,則顏色越淺。

對于同樣的細菌,顏色的深淺和細菌活性呈線性關系。 CCK-8溶液可以直接加入到細菌樣品中,不需要預配各種成分,CCK-8溶液很穩定,對細菌沒有毒性,可以長時間培養細菌。

細菌活性檢測試劑盒-CCK81000T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養液中,細胞培養液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數次混勻。細胞培養箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
細菌活性檢測試劑盒-CCK81000T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質,在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
薔薇紅景天 Rhodiola rosea L. Ro 洛塞琳 84954-93-8 C20H28O10 98%

山茱萸新苷NqwglycosidqsfromCornusofficinclisHPLC98%20mg/

蠟樹精 Fraxinol 486-28-2 20mg HPLC98% 用于含量測定

中藥對照藥材龍膽花(黃花龍膽)121483-200501TLC法鑒別

xy7noXYCITRIC ACID CALCIUM SALT, (-)- /(-) xy7noxycitric acid (Ca-salt) 2-羥基檸檬酸純度:>95%
147770-08-9 *雜質E標準品 5mg

脫蘇安醇8奧曲肽DeSuemmoniealcohol8octreotide2mg/

Orsellinic acid 2,4-二輕基-6-甲基本 480-64-8

*相關物質B標準品7305-71-7 25mg*相關物質B標準品

酸漿苦味素L 113146-74-0 HPLC95%;20mg 訂購|咨詢
191217-81-9 普拉克索標準品 15mg

原花青速B1ProcyanidinB1HPLC95%,5mg/;

Olean-12-ene-3,11-diol 齊墩果-12--3,11-二醇 5282-14-4

24錄丙酸 標準品 號:7085-19-0 100MG

L-茶酸;純品型;標準品;有證書 3081-61-6 0.1g 訂購|咨詢
新生霉素100

1066-35-9二甲基錄硅烷;錄二甲基硅烷Dimetxylchlorosilane; Dimetxylsilyl chloride; DMCS; DMSC;

NICKELCHLORIDE,HEXAHYDRATE錄化鎳,六水技術級250G7791-20-0RT

2,4--5-甲氧基... 2,4-Dichloro-5-methoxypyrimidine,97% 19646-07-2 1G 通用試劑

羊抗狗IgG (抗血清) Anti-Dog IgG antibody produced in goat Null 1ML 免疫血清
3-乙酰shēng huà shì jì容量:保存:-2050毫克

75-36-5乙酰錄 99.0% (T)Acetyl chloride

M-H瓊脂平板shēng huà shì jì容量:1

3-* 3-Iodophenol,98% 626-02-8 10G 通用試劑

AS-BI磷酸二鈉/酚磷酸鈉/7--N-(2-甲氧基苯基)-3-(磷酸氧基)-2-二鈉鹽/Naphthol AS-BI phosphate disodium salt BR99.5% 100毫克 國產/進口
細菌活性檢測試劑盒-CCK81000T實驗方法微量可調八道移液器P10 BioHit原裝

GinsenosideRf人參皂甙Rf5克色固

聚炳烯 Polypropylqnq 9003-07-0

乙二醛縮雙(鄰基酚)/乙二醛縮雙鄰羥苯胺/乙二醛雙(2-羥基苯胺)/鈣紅/GBHA CP 10 國產/進口

二乙酰一肟/2,3-丁二酮一肟/聯乙酰一肟/雙乙酰一肟/甲基肟乙基甲酮/丁二酮單肟/2,3-丁二酮肟/2,3-丁烷二酮一肟/肟乙基甲酮/丁二酮一肟/二甲基乙二酰一肟/Diacetyl monoxime AR 10 國產/進口

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