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更新時間:2017-07-06 08:54:02瀏覽次數(shù):182次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue500T售后服務(wù)實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue500T售后服務(wù)注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-R122大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞*培養(yǎng)基100mL
IL13RA2 Others Canine 狗 IL13RA2 / IL13R 人細胞裂解液 (陽性對照)
KYSE30細胞,人食管鱗癌 人膠質(zhì)母細胞瘤細胞,A172細胞 山羊皮膚細胞;WGS1
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2
PECAM1 Others Human 人 CD31 / PECAM1 人細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0332Dami(人巨核細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
IL17A Others Human 人 IL17 / IL17A CHO細胞裂解液 (陽性對照)
人淋巴內(nèi)皮細胞總RNAHLEC tRNA
雪羊皮膚細胞;SSHS1 大鼠雪旺細胞,RSC96細胞 Ca761細胞,615小鼠癌瘤株
人支氣管上皮樣細胞;BEAS-2B
HA Others H1N2 甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
F3 Others Human 人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照)
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)
22RV1 人前列腺癌細胞
MDCK-EGFP-puro(慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)狗腎上皮細胞 MDCK-EGFP-puro (lentiviral construct stable strains of canine renal epithelial cells) EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin
PDGFC Protein Human 重組人 PDGF-C / SCDGF 蛋白 (His 標簽)
人肺泡上皮細胞 (HPAEpiC)( 1×106 ) rCF, 大鼠心臟成纖維細胞 Rattus
小鼠YY肽(PYY)ELISA試劑盒 ,英文名: PYY ELISA Kit
人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA檢測試劑盒Humanalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 96T/48T
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B,MMP-9 ELISA Kit
英文名稱RatCCL7ELISAKit大鼠CCL7規(guī)格:96T/48T
口腔粘膜細胞基因組DNA純化試劑盒50次
ELISAKitCortisol人*規(guī)格:48T/96T
小鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cyclophilin A (CyPA) ELISA Kit 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A(CyPA)ELISA試劑盒
HumanLeptinSolubleReceptor,sLRELISAKit 人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-teichoicacidantibody,TAELISA試劑盒人抗磷壁酸抗體(TA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物線粒體粗提分離試劑盒10次
HumanTri-iodothyronine,T3ELISAKit人三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
酵母活性檢測試劑盒-AlamarBlue500T售后服務(wù)小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠11β羥基類固醇脫氫酶(11β-HSD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶(1,3-βDglucosidase)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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