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CFSE細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒500T實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-07-06 08:56:38瀏覽次數(shù):278次

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CFSE細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒500T實(shí)驗(yàn)方法公司供應(yīng)的細(xì)胞生物學(xué)試劑品種齊全,質(zhì)量保證,*,歡迎廣大科研用戶(hù)選購(gòu)!

CFSE細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒500T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線(xiàn)粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線(xiàn)粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
1)取 1060 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細(xì)胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
CFSE細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒500T實(shí)驗(yàn)方法注意事項(xiàng)
1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過(guò)皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
7PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
CoC1/DDP(人卵巢耐藥細(xì)胞亞株) 5×106cells/瓶×2

CM-R066大鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

EFNB2 Others Human Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

MGC-803細(xì)胞,人胃腺癌細(xì)胞 人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞(H4),H4細(xì)胞 非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;MuM-2C

PVR Others Human PVR / CD155 / NECL5 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0018A9(小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IL13 Others Human IL13 / ALRH CHO細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)添加物OEpiCGS

瘤牛皮膚細(xì)胞;BIN-S1 白血病單核細(xì)胞,J-1111細(xì)胞 5637(膀胱癌細(xì)胞)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM9801

TNFSF11 Others Human TNFSF11 / RANKL / CD254 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
SEMA5A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild

人成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

C918細(xì)胞,人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞 糞腸球菌(高耐) 正常小鼠Sertoli細(xì)胞;TM4

CCL16 Protein Human 重組人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LTEP-a-2(人肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠V-Jun肉瘤病毒癌基因同源物(JUN)ELISA試劑盒 ,英文名: JUN ELISA Kit

人血紅蛋白β亞基(HB-β)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanβ-subunitsofhemoglobin,HB-βELISAKit 96T/48T

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1/Collagenase I)免疫試劑盒 Rat matrix metalloproteinase 1,MMP-1/Collagenase I ELISA kit

英文名稱(chēng)RatCCL17ELISAKit大鼠CCL17規(guī)格:96T/48T

蘭花Malmgen培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑

ELISAKitFⅨ人*Ⅸ規(guī)格:48T/96T
小鼠肝脂酶(HL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human eosinophil chemotactic factor (ECF) ELISA Kit 人鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒

Humanferritin,FEELISAKit 人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanAnti-tissuetranGSlutaminaseIgA,tTG-IgAELISA試劑盒人抗組織轉(zhuǎn)*酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物氧化型*(GSSG)濃度高效液相色譜定量檢測(cè)試劑盒50

HumanTransformingGrowthfactorβ1TGF-β1ELISAKit人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CFSE細(xì)胞增殖與毒性檢測(cè)試劑盒500T實(shí)驗(yàn)方法豚鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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