當前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞增殖/毒性檢測>> 細胞活性檢測試劑盒-綠色熒光500T使用說明書
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更新時間:2017-07-06 08:57:47瀏覽次數(shù):152次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)細胞活性檢測試劑盒-綠色熒光500T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
細胞活性檢測試劑盒-綠色熒光500T使用說明書操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
細胞活性檢測試劑盒-綠色熒光500T使用說明書實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
COLO 320(人結(jié)腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-R050大鼠卵巢顆粒細胞*培養(yǎng)基100mL
CDH1 Others Human 人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 人細胞裂解液 (陽性對照)
BGC-823細胞,人低分化胃癌細胞 人腦膠質(zhì)母細胞瘤細胞,SW038-C2細胞 EB病毒轉(zhuǎn)化的絨猴淋巴細胞;B95-8
人前列腺癌高轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M IE8
CD14 Others Human 人 CD14 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H016人呼吸道上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
IL12B Others Rat 大鼠 IL12B / IL-12B 人細胞裂解液 (陽性對照)
原代心肌細胞特制基礎(chǔ)培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/250/100ml
KG-1細胞,人白血病細胞 小鼠子細胞,U14細胞 滑膜細胞培養(yǎng)基SM-prf
NCI-H1688(人典型小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2
BGC823(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M014小鼠氣管和支氣管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL 人急性早幼粒白血病細胞;HL-60
CD53 Others Mouse 小鼠 CD53 (aa 107-181) 人細胞裂解液 (陽性對照)
犬胸腺細胞;cf2Th
皮膚癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
GT1.1細胞,小鼠垂體瘤細胞(分泌促生長激素分泌激素) 人卵巢癌細胞系,Anglne細胞 人骨骼肌細胞裂解物HSkMCL
恒河猴腎細胞;LLC-MK2
IFNW1 Others Human 人 Interferon omega-1 / IFNω / IFNW1 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血紅蛋白H(HbH)免疫試劑盒 Human Hemoglobin H,HbH ELISA Kit
人抗骨骼肌抗體(ASA)ELISA試劑盒 ,英文名: ASA ELISA Kit
RatInterleukin11,IL-11ELISA試劑盒大鼠白介素11(IL-11)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanglomerularbasementmembraneantibogy,GBMELISA試劑盒人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterleukin2,IL-2ELISAKit人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠肝炎病毒(MHV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 人雙氫睪酮(DHT)ELISA試劑盒
Humansolubleplaetendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit 人可溶性血小板內(nèi)皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-toxoplasmaIgGantibody,anti-toxIgGELISA試劑盒人抗弓形體IgM抗體(anti-toxIgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法測定試劑盒(單線態(tài)氧氣)20次
Humantransferrinreceptor,TFRELISAKit人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞活性檢測試劑盒-綠色熒光500T使用說明書兔子轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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