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真菌活性檢測試劑盒1000T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
真菌活性檢測試劑盒1000T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發波長546nm,發射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發波長Ex=546 nm; 發射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
真菌活性檢測試劑盒1000T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
EAC(小鼠艾氏腹水癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CM-H114人前脂肪細胞*培養基100mL
CD4 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD4 人細胞裂解液 (陽性對照)
9811C11細胞,人胃癌細胞 人骨肉瘤細胞,SW1353細胞 人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2
人前列腺癌細胞;LNCaP
C2 Others Human 人 C2 / Complement Component 2 人細胞裂解液 (陽性對照)
兔主動脈平滑肌細胞;SMC
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
J82 人膀胱移行細胞癌
NCI-H716 [H716]人結直腸腺癌細胞 NCI-H716 [H716] human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
VEGFA Protein Human 重組人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白
小鼠中腦縫神經細胞(腦脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 人結腸癌細胞 Human
IGSF3 Others Human 人 IGSF3 / EWI-3 人細胞裂解液 (陽性對照)
人EB病毒轉化的B細胞;CGM1
NCI-H1395 人肺腺癌細胞
Raw264.7, 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞
LGALS1 Protein Human 重組人 Galectin-1 / LGALS1 蛋白
人肝細胞;QSG-7701 [QSG7701] 人呼吸道上皮細胞*培養基 100mL
大鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血管舒緩激肽(BK)免疫試劑盒 Human Bradykinin,BK ELISA Kit
人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA試劑盒 ,英文名: LSP ELISA Kit
RatInterleukin16,IL-16ELISA試劑盒大鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒規格:96T/48T
Humanglucokinaseregulatoryprotein,GKRPELISA試劑盒人葡萄糖激酶調節蛋白(GKRP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
HumanInterleukin5,IL-5ELISAKit人白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒規格:96T/48T
小鼠鈣結合蛋白(CR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat endocrine gland vascular endothelial growth factor (EG-VEGF) ELISA Kit 大鼠內分泌腺來源的血管內皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒
Humanthrombospondin1,TSP-1ELISAKit 人血小板反應蛋白/*敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanApolipoproteinE,Apo-EELISA試劑盒人載脂蛋白E(Apo-E)ELISA試劑盒規格:96T/48T
植物葉綠體F型ATP酶(FtypeATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
humantoll-likereceptor2,TLR2ELISAKit人toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒規格:96T/48T
真菌活性檢測試劑盒1000T免費代測兔子腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子內皮抑素(ES)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子內皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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