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真菌活性檢測試劑盒250T實驗方法

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更新時間:2017-07-06 09:00:23瀏覽次數(shù):245次

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真菌活性檢測試劑盒250T實驗方法實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 200×),按照每50μL JC-1200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
    把試劑盒中提供的CCCP10mM )*按照1 1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
1)取 1060 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 孵育20 分鐘。
3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液()加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(),并放置于冰浴。
437孵育結(jié)束后,600g 4 離心3 4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
5)用JC-1 染色緩沖液()洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液()重懸細胞,600g 4 離心 34 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
6)再用適量 JC-1 染色緩沖液()重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
真菌活性檢測試劑盒250T實驗方法注意事項
1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
2PIpropidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
3Annexin V-FITCPI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
7PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
Eca-109(人食管癌細胞) 5×106cells/瓶×2

CM-H106人內(nèi)臟脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL

CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 人細胞裂解液 (陽性對照)

MGC803-GFP細胞,綠色熒光蛋白標記人胃癌細胞 人成骨肉瘤細胞,Saos-2細胞 293來源病毒包裝細胞;ΦA-GP

人骨肉瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]

C2 Others Human C2 / Complement Component 2 人細胞裂解液 (陽性對照)
兔腎細胞;RK-13

IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)

Ishikawa 人子宮內(nèi)膜癌細胞

T84人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞 The cell T84 of human colon adenocarcinoma of lung metastasis D-MEM/F-12培養(yǎng)基+5%FBS

VEGFA Protein Human 重組人 VEGF 183 / VEGF-A 蛋白

小鼠腦膜細胞(MMC)(5×105) CNE1, 人鼻咽癌細胞系 Human
STC2 Others Human STC2 / Stanniocalcin 2 人細胞裂解液 (陽性對照)

T淋巴瘤細胞Jurkat亞系;Jurkat77

RA, 大鼠星形膠質(zhì)細胞

3T3/e細胞,小鼠成纖維細胞 白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細胞,JEG-3/VP16-IL-2細胞 人腎系膜細胞RNAHRMC miRNA5 μg

恒河猴肺細胞;RM-L1

EPHB4 Others Human EphB4 / HTK 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠Osterix蛋白(OSX)ELISA試劑盒 ,英文名: OSX ELISA Kit

人血管舒緩激肽(BK)ELISA檢測試劑盒HumanBradykinin,BKELISAKit 96T/48T

大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)免疫試劑盒 Rat Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit

CLIAKitfor人高香草酸(HVA)ELISAKit人高香草酸規(guī)格:48T/96T

磷酸二酯酶4A(Phosphodiesterase4A)0.25單位

ELISAKitMCP/CD46人膜輔蛋白規(guī)格:48T/96T
小鼠附睪蛋白4(HE-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human aquaporin 5 (AQP-5) ELISA Kit 人水通道蛋白5(AQP-5)ELISA試劑盒

Humanplaetmembraneglycoproteinba,GP-baELISAKit 人血小板膜糖蛋白Ⅱba(GP-ba/CD41+CD61)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanApolipoproteinH,apo-HELISA試劑盒人載脂蛋白H(Apo-H)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物葉綠體核糖體分離試劑盒10

HumanTNFαconvertingenzyme,TACEELISAKit人壞死因子α轉(zhuǎn)化酶(TACE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌活性檢測試劑盒250T實驗方法兔子免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子免疫球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

 

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