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磷酸化蛋白純化試劑盒50 次說明書

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更新時間:2017-07-18 16:17:54瀏覽次數(shù):136次

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磷酸化蛋白純化試劑盒50 次說明書如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

磷酸化蛋白純化試劑盒50 次說明書產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發(fā)了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
磷酸化蛋白純化試劑盒50 次說明書詳細說明書:

磷酸化蛋白純化試劑盒50 次說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實驗。直接裂解的優(yōu)點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
磷酸化蛋白純化試劑盒50 次說明書對于培養(yǎng)細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
N-亞硝基本基羥鹽,英文名或英文縮寫:Cupferron,級別:CP,規(guī)格:25

N,N-Dimetxylfonmemi7e 500ml原裝 Amresco 0464

MES,FREEACID,MONOHYDRATEMES緩沖液,一水超純級

亞芐基炳同 Bqnzclccqtonq 1-27-6

dADP,2Na2-脫氧腺苷-5-二嶙酸二鈉鹽1000uBR
維生素Eshēng huà shì jì容量:30KU

628-97-7棕櫚酸乙酯;軟脂酸乙酯;十六酸乙酯etxyl palMitate;etxyl hexadecanoate;etxyl hexadecylate;etxyl cetylate;

氧化*,英文名或英文縮寫:Ammothamnine,級別:BR98%,規(guī)格:5

4-甲基-3-硝基 4-Methyl-3-nitropyridine,97% 5832-44-0 1G 通用試劑

酶測試盒(可見光分光光度法)/CAT測試盒(可見光分光光
5-羥基吲哚乙酸shēng huà shì jì容量:28℃,避光1

10294-41-4 99%CERIUM(III) nitnATE HEXAHYDRATE

嶙酸烯醇酸單環(huán)己鹽shēng huà shì jì容量:RT25

1,8-二羥基醌 1,8-Dihydroxyanthraquinone,96% 117-10-2 25G 通用試劑

化鋰 Lithium Chloride (99%,ACS) 7447-41-8 100G 通用試劑
ITGA8 & ITGB1 Others Human ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)

人毛細胞總RNAHHDPC tRNA

KYSE450 人食管癌細胞

CL-0328CEM/C1(人急性淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2

rEPC,大鼠內皮祖細胞-骨髓

人皮膚成纖維樣細胞;HSF2 人子宮平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
人毛細胞總RNAHHDPC tRNA

ITGA8 & ITGB1 Others Human ITGA8 & ITGB1 Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)

KYSE450 人食管癌細胞

CL-0328CEM/C1(人急性淋巴細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2

rEPC,大鼠內皮祖細胞-骨髓

人皮膚成纖維樣細胞;HSF2 人子宮平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
磷酸化蛋白純化試劑盒50 次說明書hMNC-CB 人類臍帶血單核細胞團塊單一捐獻者,超純 > 1 mio.cells 人心臟微血管內皮細胞總RNAHCMEC tRNA

CM-M060小鼠腎動脈內皮細胞*培養(yǎng)基100mL

CDH8 Others Rat 大鼠 Cadherin-8 / CDH8 人細胞裂解液 (陽性對照)

HeLa-S3細胞,人細胞 小鼠胚胎成纖維細胞(來自NIH3T3),PA12細胞 主動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

Hce-8693(人盲腸腺癌細胞(未分化)) 5×106cells/瓶×2

成纖維細胞培養(yǎng)基FM-prf

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