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細胞表面蛋白分離試劑盒8次操作步驟

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更新時間:2017-07-18 16:19:11瀏覽次數:133次

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細胞表面蛋白分離試劑盒8次操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

細胞表面蛋白分離試劑盒8次操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
細胞表面蛋白分離試劑盒8次操作步驟詳細說明書:

細胞表面蛋白分離試劑盒8次操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
細胞表面蛋白分離試劑盒8次操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
ORANGEGwo7iumSALT橙黃G 鈉高純級100G1936-15-8RT

(N-乙酰-D-基葡萄糖)

5--2'-脫氧*核苷,英文名或英文縮寫:5-IDU,級別:BR85%,規格:50毫克

言醋本拂雷司 BqNFLUORqX xy7noCHLORIDq 360-78-0

*錄化物,英文名或英文縮寫:Cholesteryl chloride,級別:超純,99%,規格:1KU
維生素E測試盒shēng huà shì jì容量:RT

26873-85-8聚蔗糖400Polysucrose

2-氧代丁酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium 2-oxobutyrate,級別:BR97%,規格:25

伊紅美藍瓊脂 Eosin-Methylene Blue Agar (EMB) Null 250G 培養基

焦碳醋二酯 Diqthylpyroccronctq 1609-47-8
5-腺苷二嶙酸二鈉鹽shēng huà shì jì容量:1公斤

4553-62-22-甲基戊二2-metxYLGLUTAROnitnILE

shēng huà shì jì容量:100

2-甲氧基乙氧基甲基 2-Methoxyethoxymethyl chloride,95.0% 3970-21-6 5G 通用試劑

龍腦 Borneol (98%,HPLC) 507-70-0 20MG 標準品
CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人男性正常細胞;Hs68

人輸尿管上皮細胞*培養基 100mL

B16BL6細胞,小鼠黑色素瘤細胞 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞) EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM932

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113 His 標簽)

SH-SY5Y(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人細胞裂解液 (陽性對照)
人男性正常細胞;Hs68

CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人輸尿管上皮細胞*培養基 100mL

B16BL6細胞,小鼠黑色素瘤細胞 VERO C1008 (E6)(非洲綠猴腎細胞) EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KM932

CCL15 Protein Human 重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 22-113 His 標簽)

SH-SY5Y(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 人細胞裂解液 (陽性對照)
細胞表面蛋白分離試劑盒8次操作步驟ZR-75-1(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-);LTK-

人視網膜色素上皮細胞cDNAHRPEpiC cDNA

TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細胞裂解液 (陽性對照)

WB-F344細胞,大鼠肝上皮樣干細胞 HL-60(白血病原髓細胞) 大鼠肝細胞瘤;H4-II-E-C3

EFNA1 Protein Rat 重組大鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 標簽)

真皮成纖維細胞*培養基 100mL

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