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親和層析柱50 mL操作步驟詳細說明書:
親和層析柱50 mL操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
親和層析柱50 mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
親和層析柱50 mL操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
LEUPEPTIN亮抑酶肽超純級25MG103476-89-7Frozen
(啶酮酸)
甜菊糖甙,英文名或英文縮寫:Stevioside,級別:BR,98%,規格:10克
三拂化硼-二迷絡合物 Boron trifluoridq dimqthyl qtqrctq 323-4-4
伊紅B,英文名或英文縮寫:Eosin B,級別:高純,99%,規格:250毫克
維生素B31KU2~8℃,避光
464-06-22,2,3-*基丁烷;異丙基*基甲烷;五甲基乙烷2,2,3-Trimetxylbutane;Triptane;Pentametxylethane
2-Chloro-5-cyanopxenyl boronic acid pinacol ester 863868-30-8
土木香內酯標準品 Alantolactone,≥97.0% 546-43-0 20MG 通用試劑
四硼醋內,十水合 Nc
5-溴*shēng huà shì jì容量:100克
磺安基嘧啶 SulfcMqrczinq 17-79-7
2,4-Bis(benzyloxy)pyrimidine-5-boronic acid 70523-24-9
乙酰乙酰苯胺 Acetoacetanilide,≥99.5% 102-01-2 250G 通用試劑
L-蘇醇/H-蘇醇/L-Threoninol BR,97%, 1克 國產/進口
NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
人腦血管平滑肌細胞cDNAHBVSMC cDNA
小鼠肝癌瘤株;H22
GBC-SD細胞,人膽囊癌細胞 人APP基因轉染CHO細胞株,7WD10細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
Li-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28019 MSC Growth Medium DXF, 間充質干細胞生長培養基DXF—無血清培養基 500ml
人腦血管平滑肌細胞cDNAHBVSMC cDNA
NRN1L Others Human 人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠肝癌瘤株;H22
GBC-SD細胞,人膽囊癌細胞 人APP基因轉染CHO細胞株,7WD10細胞 中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
Li-7(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28019 MSC Growth Medium DXF, 間充質干細胞生長培養基DXF—無血清培養基 500ml
親和層析柱50 mL操作步驟COQ7 Others Human 人 COQ7 人細胞裂解液 (陽性對照)
tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6
人腦膜細胞 (HMC)( 5×105 )
人結直腸腺癌細胞;Caco-2 大鼠腸微血管細胞*培養基 100mL
EAC 小鼠艾氏腹水癌細胞
腸動脈內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
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