一站式 MBP 標簽蛋白純化套裝20 次操作步驟詳細說明書：

一站式 MBP 標簽蛋白純化套裝20 次操作步驟產品及特點：
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法，但是單獨配制各種溶液十分繁瑣，為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式，即開即用，用戶不需單獨準備各種成分，十分方便。
2. 安全，將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活，分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE，滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液，由于其含有染料，制備的濃縮膠呈藍色，便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
一站式 MBP 標簽蛋白純化套裝20 次操作步驟對于組織樣品：
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鐘內加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小，可以適當剪切后直接加入裂解液裂解，通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清，用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便，不必使用勻漿器，缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
一站式 MBP 標簽蛋白純化套裝20 次操作步驟對于培養細胞樣品：
1. 融解 RIPA 裂解液，混勻。取適當量的裂解液，在使用前數分鐘內加入 PMSF， 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞：去除培養液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后，細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠，但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
GENEPAGEPLUS5.25%6MUREA*CLDPAK5.25% GENE PAGE PLUS, 6M 尿素生物技術級100MLCOLD

Nicotinicacid 25g/100g/500g/1kg原裝 Sigma N4126

對藍，英文名或英文縮寫：BCIP，級別：CP，98.5%，規格：1毫克

硼完四輕呋喃溶液(+4℃) Borcnq-tqtrcxy7nofurcn complqx 14044-62-6

兒價分桔黃四鈉，英文名或英文縮寫：xyleol Orange tetrawo7ium salt，級別：高純，規格：5克
微球菌粉96支/盒RT

16919-58-7錄鉑酸銨Ammonium chloroplatinate

無水錄化鈣5克RT，避光

安息香 Benzoin ethyl ,97% 574-09-4 25G 通用試劑

偶氮膦Ⅲ/偶氮磷Ⅲ/膦酸偶氮III/2，7-雙(4--2-膦羧苯偶氮)-1，8-二羥基-3，6-二磺酸/CPA-Ⅲ 顯色劑 1克 國產/進口
6-甲基25克

(3-7萬)(多聚-L-賴酸)

洋橄欖油，英文名或英文縮寫：Olive oil，級別：BR，97%，規格：5克

6-鱗醋-葡萄糖醋-三內鹽(-20℃) 6-PHOSPHOGLUCONIC cCID TRIwo7ium ScLT 23411-70-4

N-乙酰本，英文名或英文縮寫：Acetanilide，級別：CP，規格：5克
FCER2 Others Mouse 小鼠 FCER2A / CD23 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺成纖維細胞;IMR-90

NCI-H358 人非小細胞肺癌細胞

LX-2, 人肝星形細胞株

人臍靜脈平滑肌細胞

人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C 人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養基 100mL
人胚肺成纖維細胞;IMR-90

COLEC12 Others Rat 大鼠 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0323BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細胞)5×106cells/瓶×2

HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞 人惡性多發性畸胎瘤細胞，NTERA-2細胞 Beta-TC-6(小鼠胰腺癌beta細胞)

人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;M619

CD200R1 Others Human 人 CD200R1 / CD200R 人細胞裂解液 (陽性對照)
一站式 MBP 標簽蛋白純化套裝20 次操作步驟HWP-c subcutaneous 人類白前脂肪細胞(HWP)皮下 500,000cells 人淋巴成纖維細胞HLF

786-O [786-0], 人腎透明腺癌細胞

CD300LG Others Human 人 CLM-9 / TREM4 / CD300LG 人細胞裂解液 (陽性對照)

KC細胞，人腎癌細胞 小鼠腦神經瘤細胞,Neuro-2a[N2a;Neuro-2a]細胞 CL-0373KiMA(人胚腎上皮細胞系)5×106cells/瓶×2

BGC-803(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2

表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET