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預稀釋 BSA 蛋白標準品7×1mL操作步驟

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更新時間:2017-07-19 14:20:52瀏覽次數:125次

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預稀釋 BSA 蛋白標準品7×1mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

預稀釋 BSA 蛋白標準品7×1mL操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
預稀釋 BSA 蛋白標準品7×1mL操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
預稀釋 BSA 蛋白標準品7×1mL操作步驟詳細說明書:

預稀釋 BSA 蛋白標準品7×1mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
TRITONX-102曲拉通 X-102試劑級100ML9002-93-1RT

(n-辛基-b-D-硫代毗喃葡萄糖苷)

偶氮錄嶙Ⅳ,英文名或英文縮寫:CPA-Ⅳ,級別:色固,規格:25

BOC-L-半胱安醋 BOC-CYS-OH 0887-92-0

細胞核堅牢紅,英文名或英文縮寫:Nuclear fast red,級別:色固,規格:250毫克
微量可調移液器P20shēng huà shì jì容量:5

(電泳等電點標準PH2.5-6.5)

L-脯酰胺25

9- 9-Mqthylcnthrccqnq 779-0-

FERROUSSULFATE,ANxy7noUS亞鐵,無水美國藥典級1KG7720-78-7RT
6-錄嘌呤shēng huà shì jì容量:100

10099-74-8鉛標準溶液Lead dinitnate

shēng huà shì jì容量:100

2- 2-Chloroanthraquinone,97% 131-09-9 25G 通用試劑

檸檬酸鋰 Lithium Citrate Tribasic Tetrahydrate ... 6080-58-6 250G 通用試劑
PROS1 Others Human PROS1 / Protein S 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺成纖維細胞;MRC-5

CL-0335EBTr (NBL-4) (牛胚氣管細胞)5×106cells/瓶×2

45.6.TG1.7細胞,骨髓瘤細胞 T細胞白血病細胞,HuT 78細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0901

293(人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2

FCGR2B Others Human CD32b / FCGR2B 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細胞;MRC-5

IL1R2 Others Mouse 小鼠 IL1R2 / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照)

人膀胱平滑肌細胞*培養基 100mL

Hepa 1-6細胞,小鼠肝癌細胞 PC-12(腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0923

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標簽)

SK-Hep-1(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 IL17RD 人細胞裂解液 (陽性對照)
預稀釋 BSA 蛋白標準品7×1mL操作步驟GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細胞病毒 HCMV gB ECD 人細胞裂解液 (陽性對照)

tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細胞(B);P19-CAG-tTA-1D3

ALCAM Others Rat 大鼠 ALCAM / CD166 人細胞裂解液 (陽性對照)

Saos-2細胞,骨肉瘤細胞 人細胞,Hela P10s-11F細胞 人腦微血管內皮細胞總RNAHBMEC tRNA

VERO細胞衍生株;SVP

膀胱上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

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