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重組蛋白 A1mg圖片對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
重組蛋白 A1mg圖片產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1. 一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
重組蛋白 A1mg圖片詳細說明書:
重組蛋白 A1mg圖片對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF, 使 PMSF 的終濃度為 1mM。
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
TRIS-ACETATE-SDSBUFFER,10XTris-醋酸-SDS電泳緩沖液超純級500MLRT
(Mycostatin)(*)
4,4′-四甲基二基二本甲酮,英文名或英文縮寫:Michler's ketone,級別:BR,0.1%,規格:1毫克
二本酚A-d16 98 atom % D BISPHqNOL c-D16 9610-87-6
*,英文名或英文縮寫:VB3,級別:BS,規格:25克
微量可調移液器P2 支 Gilson原裝
Gumtragacanthpowder西黃蓍膠粉5克GR,99.5%
多烯多安 Polyqthylqnq-polycminqs 68131-73-7
乙醛肟/亞乙基胲/Acetaldoxime BR,99%, 100毫升 國產/進口
反式-2-己烯酸/反-2-己烯酸/(E)-2-己烯酸/2-己烯酸反式/Trans-2-Hexenoic acid BR,99%, 10克 進分
6-溴己酸,英文名或英文縮寫:6-Bromohexanoic acid,級別:AR,98%,規格:5克
BisBenzimideHoechstNo.33342 25mg/100mg/500mg Sigma B2261
BETAINExy7noCHLORIDE甜菜堿超純級1KG590-46-5RT
鱗醋二輕銨;一鹽基鱗醋銨 cMMoniuM dixy7nogqn phosphctq;cMMoniuM biphosphctq;PriMcry cMMoniuM phosphctq;cMMoniuM ccid p
TMEM27 Others Human 人 TMEM27 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
F344大鼠骨髓間質干細胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cells
HME2細胞,人黑色素瘤細胞 干酪乳桿菌干酪亞種 人癌細胞;MCF7
USMC(大鼠血管平滑肌細胞) 5×106cells/瓶×2
IBRS-2(豬腎細胞) 5×106cells/瓶×2 Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞 人骨肉瘤細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細胞裂解液 (陽性對照)
狗骨髓間質干細胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells
HME7細胞,人黑色素瘤細胞 短雙歧桿菌 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;HH-29
UM-UC-3(人膀胱移行細胞癌) 5×106cells/瓶×2
HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內皮細胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞 人癌細胞;MDA-MB-435S
重組蛋白 A1mg圖片ARSA Others Mouse 小鼠 ARSA 人細胞裂解液 (陽性對照)
人B淋巴母細胞;HMy2.CIR
NTRK1 Others Canine 狗 TrkA / NTRK1 人細胞裂解液 (陽性對照)
T84細胞,人結腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,NW38細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0919
HCC1937(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
白鰱尾鰭細胞系;SCF
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