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重組蛋白 L1mg說明書

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更新時間:2017-07-19 14:27:24瀏覽次數:169次

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重組蛋白 L1mg說明書如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

重組蛋白 L1mg說明書對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
重組蛋白 L1mg說明書產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
重組蛋白 L1mg說明書詳細說明書:

重組蛋白 L1mg說明書對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
3,4-乙撐二氧噻吩,英文名或英文縮寫:EDOT,級別:2N99%,規格:10

OPD 5g/10g/50g/250g原裝 Amresco 0688

TBE,5XLIQUIDCONCENTRATE5X TBE 濃縮液超純級5LRT

R-Alpine-硼完 B-ISOPINOCcMPHqYL-9-BORcBICYCLO[3.3.1]NONcNq 7364-47-

Aluminumphosphate三堿式嶙酸鋁100毫克AR98.5%
微量可調移液器P100 Gilson原裝

Gold金粉500BR90%

高密度聚烯 Polyqthylqnq, High Dqnsity 900-88-4

乙醛酸/甲醛/二羥醋酸/Glyoxylic acid BR98% 25 國產/進口

反丁烯二酸/延胡索酸/富馬酸/紫堇酸/E)-2-丁烯二,-1,2-二羥酸/12-二羧酸/TMEDA CP99% 100 國產/進口
78-本并黃酮,英文名或英文縮寫:α-Naphthoflavone,級別:CP99%,規格:250毫克

煌綠瓊脂NA

玫瑰紅銀試劑,英文名或英文縮寫:4-Dimetxylaminobenzal rhodanine,級別:ACS90%,規格:25

7,2-二羥基-3,4... 7,2-dihydroxy-3,4-dimethoxyisofl... 94367-43-8 20MG 通用試劑

十基環五硅氧烷 Dqccmqthylcyclopqntcsiloxcnq 241-0-6
IGSF8 Others Mouse 小鼠 PGRL / IGSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚肺二倍體細胞;2BS

人腎動脈平滑肌細胞*培養基 100mL

F9細胞,小鼠畸胎瘤細胞 A549 [A-549](肺癌細胞) 人癌細胞;MDA-MB-453

CXCL16 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽)

SK-N-SH(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺二倍體細胞;2BS

IGSF8 Others Mouse 小鼠 PGRL / IGSF8 人細胞裂解液 (陽性對照)

人腎動脈平滑肌細胞*培養基 100mL

F9細胞,小鼠畸胎瘤細胞 A549 [A-549](肺癌細胞) 人癌細胞;MDA-MB-453

CXCL16 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標簽)

SK-N-SH(人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Alpha 1 Antitrypsin / SerpinA1a 人細胞裂解液 (陽性對照)
重組蛋白 L1mg說明書FCGR2 Others Mouse 小鼠 CD32 / FCGR2B 人細胞裂解液 (陽性對照)

倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11

IL11RA Others Canine IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人細胞裂解液 (陽性對照)

HPB-ALL細胞,T細胞白血病細胞 人前列腺癌細胞高轉移亞系,PC-3M 1E8細胞 人心臟成纖維細胞總RNAHCF tRNA

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3

WM451, 人黑色素瘤細胞

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