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植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟

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更新時間:2017-07-19 14:36:28瀏覽次數:161次

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植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
BESFREEACIDBES蛋白組學級100G10191-18-1RT

(聚乙二醇12000)

N-(2-乙酰基)-亞基二醋酸,英文名或英文縮寫:ADA,級別:絡合指示劑,規格:1

檸檬醋鉍 99.99% Bismuth citrctq 813-93-4

三號凝聚劑,英文名或英文縮寫:PHⅢ,級別:AR90%,規格:500毫克
微晶纖維素板/Microcrystalline cellulose plate 10*10 20S/ 國產/進口

SUPERBROTH,POWDER超級肉湯, 粉末生物技術級RTsigma

多聚鱗醋 Polyphosphoric ccid;Tqtrcphosphoric ccid;PPc 8017-16-1

乙二醇雙(2-基乙基)四乙酸/乙二醇雙(2-)四醋酸/乙二醇二二胺四乙酸/乙二醇雙α-基乙基醚四乙酸/乙二醇雙(2-基乙基醚)四乙酸/3,6-二氧雜-1,8-辛二胺四乙酸/EGTA AR99
8-xy7noxyinonealdine2-甲基-8-羥基500毫克AR

298-07-7磷酸二(2-乙基己基);磷酸二異辛酯;磷酸二辛酯Bis(2-etxylhexyl)phosphate;Dioctylphosphoric acid;Bis-(2-etxylhexyl)xy7nogen phosphate;Phosphoric acid-bis-(2-thylhexylester);P-204

NHSN-羥基丁二酰亞胺250BR99%

小燭樹蠟 Candelilla wax 8006-44-8
CADM4 Others Mouse 小鼠 CADM4 / IGSF4C / TSLL2 人細胞裂解液 (陽性對照)

人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17

NCI-H1299 人非小細胞肺癌細胞

LncaP, 人前列腺癌細胞

GRN Protein Human 重組人 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標簽)

人肝細胞;HL-7702[L-02] 人外周血白細胞*培養基 100mL
人胚腎細胞(SV40T基因修飾);293T/17

CADM4 Others Mouse 小鼠 CADM4 / IGSF4C / TSLL2 人細胞裂解液 (陽性對照)

NCI-H1299 人非小細胞肺癌細胞

LncaP, 人前列腺癌細胞

GRN Protein Human 重組人 Granulin / GRN / Progranulin 蛋白 (His 標簽)

人肝細胞;HL-7702[L-02] 人外周血白細胞*培養基 100mL
植物蛋白酶抑制劑1mL操作步驟ELANE Others Mouse 小鼠 Neutrophil Elastase / ELANE / ELA2 人細胞裂解液 (陽性對照)

CL-0058CCRF-CEM(人急性淋巴白血病細胞)5×106cells/瓶×2

FCGR2A Others Human CD32a / FCGR2A CHO細胞裂解液 (陽性對照)

牛腎細胞;MDBK(BVDV-free) 鼠胚胎成纖維細胞,PA317細胞 MLA-144細胞,長臂猿淋巴瘤

EB病毒轉化的人B淋巴細胞(拉祜族);KM9406

TUNEL色標法細胞凋亡檢測試劑盒TUNEL

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