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低 pH 緩沖液套裝30 次操作步驟

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更新時間:2017-07-19 15:20:46瀏覽次數:108次

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低 pH 緩沖液套裝30 次操作步驟如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

pH 緩沖液套裝30 次操作步驟產品及特點:
SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)是目前電泳法變性分離蛋白質的主要方法,但是單獨配制各種溶液十分繁瑣,為此天澤基因開發了本產品。它具有下列特點:
1.
一站式,即開即用,用戶不需單獨準備各種成分,十分方便。
2. 安全,將實驗人員接觸粉末狀丙烯酰胺的可能降到低。
3. 靈活,分開提供的丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺便于配制各種比例和濃度的 SDS-PAGE,滿足分離各種大小不同的蛋白質的要求。
4. 使用改良的濃縮膠緩沖液,由于其含有染料,制備的濃縮膠呈藍色,便于上樣時識別加樣孔。
5. 電泳后可直接用于考染、銀染、Western 雜交等實驗。
pH 緩沖液套裝30 次操作步驟詳細說明書:

pH 緩沖液套裝30 次操作步驟對于組織樣品:
1. 把*切成細小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
3. 按照每 20 毫克組織加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解 液的用量。)
4.
用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是 比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。
pH 緩沖液套裝30 次操作步驟對于培養細胞樣品:
1. 融解 RIPA 裂解液,混勻。取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內加入 PMSF 使 PMSF 的終濃度為 1mM
2. 裂解細胞 2.1 對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血 清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1-2 秒后,細胞就會被裂解。 2.2 對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分 裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管, 然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續的 PAGE Western 和免疫沉淀等操作。 注意:通常 6 孔板每孔細胞加入 150 微升裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高 可以適當加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。
馬來酰鉀鹽5

半乳糖苷)

三氧化二鎵,英文名或英文縮寫:Gallium(III)oxide,級別:BR99%,規格:1

8-基本安-1-磺醋 8-cnili-ncphclqnqsulfonic ccid 8-76-8

全反-2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-廿四碳六烯,英文名或英文縮寫:Squalene,級別:CP98.5%,規格:25
shēng huà shì jì容量:25

雙甲酮溶液NA

二水偏釩酸鈉,英文名或英文縮寫:wo7ium metavanadate dihydrate,級別:CP99%,規格:1

4--3- 4-Fluoro-3-methylaniline,97% 452-69-7 5G 通用試劑

焦鈉/Sodium pyrosulfate AR40% 500 國產/進口
ADAN-(2-乙酰基)-亞基二醋酸1克絡合指示劑

鉻姆沙伯 750NA

NIV雪腐鐮刀烯醇1BR96%

羥基酚藍二鈉 Hydroxy naphthol blue disodium salt 165660-27-5 5G 通用試劑

減性品紅;鹽基品紅;減性新品紅;玫瑰本安言醋鹽 Fuchsin bcsic;Mcgqntc;Bcsic Mcgqntc;Bcsic rubin;Bcsic violqt 14;C.I. 42510 63-99-2
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照)

人前列腺上皮細胞cDNAHPEpiC cDNA

大鼠源細胞

SMMC-7721細胞,人肝癌細胞 人退行性癌細胞,Calu-6細胞 大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5

KB(人口腔表皮樣癌細胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-25210 Hepatocyte Basal Medium , 肝細胞基礎培養基 500ml
人前列腺上皮細胞cDNAHPEpiC cDNA

SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠源細胞

SMMC-7721細胞,人肝癌細胞 人退行性癌細胞,Calu-6細胞 大鼠胸大動脈平滑肌細胞;A7r5

KB(人口腔表皮樣癌細胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-25210 Hepatocyte Basal Medium , 肝細胞基礎培養基 500ml
pH 緩沖液套裝30 次操作步驟人腦瘤細胞;SF763 大鼠頜下腺上皮細胞*培養基 100mL

食管平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

DMP1 Others Human DMP1 人細胞裂解液 (陽性對照)

大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-2

Caki-1, 人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞

NRK-52E 大鼠腎細胞

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